चूहा ट्यूमर नेक्रोसिस कारक अल्फा एलिसा किट

चूहा ट्यूमर नेक्रोसिस कारक α,कैचेक्टिन,TNF,TNFSF2,TNF-α ELISA KIT

चूहों के ट्यूमर नेक्रोसिस फैक्टर अल्फा एलिसा किट के लिए टीएनएफ अल्फा 48 कुएं

किट के साथ उपलब्ध कराई गई सामग्री

सिद्धांत

इस ELISA किट में Sandwich-ELISA विधि का प्रयोग किया गया है। इस किट में दी गई Microelisa स्ट्रिपप्लेट को एक एंटीबॉडी के साथ पूर्व-कोटेड किया गया है जोटीएनएफ-एमानक या नमूनों को उपयुक्त माइक्रोइलिसा स्ट्रिप्लेट कुओं में जोड़ा जाता है और विशिष्ट एंटीबॉडी के साथ संयुक्त किया जाता है।टीएनएफ-एप्रत्येक माइक्रोइलिसा स्ट्रिप्लेट कुएं में जोड़ा जाता है और इनक्यूबेट किया जाता है। मुक्त घटकों को धोया जाता है। टीएमबी सब्सट्रेट समाधान को प्रत्येक कुएं में जोड़ा जाता है। केवल वे कुएं जिनमें होते हैंटीएनएफ-एऔर एचआरपी संयुग्मित थ्रोम्बोमोडुलिन एंटीबॉडी का रंग नीला दिखाई देगा और फिर स्टॉप सॉल्यूशन के जोड़ने के बाद पीला हो जाएगा।ऑप्टिकल घनत्व (ओडी) 450 एनएम की तरंग दैर्ध्य पर स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक रूप से मापा जाता है. ओडी मूल्य ओडी की एकाग्रता के आनुपातिक हैटीएनएफ-ए. आप की एकाग्रता की गणना कर सकते हैंटीएनएफ-एनमूने में नमूने के ओडी की तुलना मानक वक्र से करके।

नोट्स:

• प्राप्त होने पर किट को 4 डिग्री सेल्सियस पर रखें। परीक्षण से पहले किट को कमरे के तापमान पर संतुलित किया जाना चाहिए। टीएनएफ-एफ़ एंटीबॉडी-लेपित प्लेट से किसी भी अनावश्यक स्ट्रिप्स को हटा दें,उन्हें ज़िप-लॉक पन्नी में फिर से सील करें और 4°C पर रखें.
• ध्यान केंद्रित धुलाई बफर में वर्षा दिखाई दे सकती है. कृपया सभी वर्षा को भंग करने के लिए बफर को गर्म करें, जो परिणामों को प्रभावित नहीं करेगा।
• प्रयोग त्रुटि से बचने के लिए सटीक पाइपेट का प्रयोग किया जाना चाहिए। नमूनों को 5 मिनट से कम समय में माइक्रोप्लेट में जोड़ा जाना चाहिए। यदि बड़ी संख्या में नमूने शामिल हैं, तोबहु-चैनल पाइपेट की सिफारिश की जाती है.
• मानक वक्र को प्रत्येक परीक्षण में शामिल किया जाना चाहिए। प्रतिकृति कुओं की सिफारिश की जाती है। यदि नमूना का ओडी मूल्य मानक के पहले कुएं से अधिक है, तो नमूना का ओडी मूल्य मानक के पहले कुएं से अधिक होगा।कृपया परीक्षण से पहले नमूना पतला करें (n बार)मूल थ्रोम्बोमॉडुलिन एकाग्रता की गणना करते समय, कृपया कुल विरंजन कारक (XnX5) को गुणा करें।
• क्रॉस-कंटॉमिनेशन से बचने के लिए, माइक्रोप्लेट सीलर्स केवल एक बार के उपयोग के लिए हैं।
• कृपया सब्सट्रेट को प्रकाश से दूर रखें।
• सभी संचालन निर्माता के निर्देशों के अनुसार सख्ती से किया जाना चाहिए। Microtiter प्लेट रीडर द्वारा निर्धारित परिणाम।
• सभी नमूनों, वाशिंग बफर और कचरे को संक्रामक एजेंटों के रूप में माना जाना चाहिए।
• अलग-अलग बैचों के अभिकर्मकों को मिश्रित नहीं किया जाना चाहिए।

टीएनएफ-ए मानक की ज्ञात सांद्रता और इसके अनुरूप रीडिंग ओडी क्रमशः लॉगर स्केल (एक्स-अक्ष) और लॉगर स्केल (वाई-अक्ष) पर चित्रित है।नमूने में टीएनएफ-ए की एकाग्रता का निर्धारण नमूना ों के ग्राफिंग द्वारा किया जाता है।मूल एकाग्रता को पतला करने के कारक से गुणा करके गणना की जाती है।