थायरोक्सिन (T4) ELISA टेस्ट किट (सीरम)

नियत उपयोग

थायरोक्सिन का पता लगाने का किट ((T₄) ((एंजाइम-लिंक्ड इम्यूनोसॉर्बेंट एसे, ELISA) इसका उपयोग मानव सीरम में थायरोक्सिन ((T4) के मात्रात्मक परीक्षणों में किया जाता है।

सारांश और नैदानिक महत्व

थायराइड ग्रंथि अधिकांश ऊतकों के विकास और उनके चयापचय के समायोजन के लिए आवश्यक है। ये प्रक्रियाएं थायराइड हार्मोन, टी 4 और टी 3 के नियंत्रण में हैं।

पिट्यूटरी थायरोट्रोपिन (टीएसएच) के उत्तेजना के तहत, थायराइड ग्रंथि अनिवार्य रूप से टी 4 को टी 3 की छोटी मात्रा में उत्सर्जित करती है। थायराइड हार्मोन के लिए ऊतक रिसेप्टर्स टी 3 रिसेप्टर्स हैं;इस प्रकार टी3 थायराइड स्रावों की सक्रिय इकाई का प्रतिनिधित्व करता हैतथापि, टी4 का निर्धारण बहुत नैदानिक महत्व का है, क्योंकि सीरम टी4 का स्तर ग्रंथि की स्राव दर से संबंधित है।T4 से अधिक T3 में परिधीय डीओडिनैशन के लिए उपलब्ध एक अग्रदूत हार्मोन का प्रतिनिधित्व करता हैसीरम टी4 के स्तर को मानने में थायराइड सेक्रेटरी दर और डीओडिनैशन प्रक्रिया दोनों को ध्यान में रखना होगा।

सिद्धांत

टी 4 किट प्रतिस्पर्धी विधि पर आधारित है। ठोस चरण एंटीबॉडी बनाने के लिए एंटी-टी 4 के साथ सूक्ष्म अच्छी तरह से प्लेट कोट करें। नमूने का टी 4 और बायोटिन-टी 4 ठोस चरण पर एंटी-टी 4 के साथ प्रतिस्पर्धा करते हैं। संतुलन,एविडिन-एचआरपी जोड़ा गया, ठोस चरण एंटीबॉडी-बायोटिनिलेटेड टी4-एविडिन-एचआरपी परिसर का गठन किया गया। सब्सट्रेट जोड़ें और अवशोषक मूल्य का पता लगाएं।रोगी के सीरम में टी4 की मात्रा की गणना कंप्यूटर या उपयुक्त एकाग्रता-असॉर्बेंट मूल्य वक्र के ग्राफिंग के माध्यम से की जाती है.

मुख्य घटक

लेपित माइक्रोप्लेटः 1 प्लेट (8×12 कुएं), उपयोग के लिए तैयार। एंटी-टी 4 एंटीबॉडी के साथ लेपित और एल्यूमीनियम बैग में सील।खोले जाने के बाद नमी से बचाने के लिए सूखी सामग्री के साथ फिर से बंद करने योग्य बैग में स्ट्रिप्स निकालेंसमाप्ति तिथि तक 2 से 8 डिग्री सेल्सियस पर रखें।

• बायोटिन-टी4: 6 मिलीलीटर का 1 शीशी, उपयोग करने के लिए तैयार। समाप्ति तिथि तक 2 ~ 8°C पर रखें।
• Avidin- HRP Conjugate: 6 ml का 1 फ्लास्क, उपयोग के लिए तैयार। समाप्ति तिथि तक 2 ~ 8°C पर रखें।
• कैलिब्रेटर: 1 मिलीलीटर के 6 शीशी, उपयोग के लिए तैयार।₀S तक₅और T4 की एकाग्रता 0 है,20,40, 80,160समाप्ति तिथि तक 2 से 8 डिग्री सेल्सियस पर रखें।
• नियंत्रणः 1 मिलीलीटर के 2 शीशी, उपयोग के लिए तैयार. उच्च मूल्य और निम्न मूल्य के साथ लेबल किया गया. समाप्ति तिथि तक 2 ~ 8°C पर स्टोर करें. निम्न मूल्य की एकाग्रता 44.3 ~ 82.3 ng/ ml है.उच्च मूल्य की एकाग्रता 112~208 ng/ml है.
• क्रोमोजेन ए: 7 मिलीलीटर का 1 फ्लास्क, उपयोग के लिए तैयार। समाप्ति तिथि तक 2 ~ 8°C पर रखें।
• क्रोमोजेन बी: 7 मिलीलीटर का 1 फ्लास्क, उपयोग के लिए तैयार। समाप्ति तिथि तक 2 ~ 8°C पर रखें।
• बंद करो समाधानः 7 मिलीलीटर का 1 फ्लास्क, उपयोग के लिए तैयार। समाप्ति तिथि तक 2 ~ 8°C पर रखें।
• वाश बफर: 15 मिलीलीटर का 1 फ्लास्क, 20 गुना केंद्रित, परीक्षण से पहले डीआयनयुक्त पानी से पतला। समाप्ति तिथि तक 2 ~ 8 डिग्री सेल्सियस पर स्टोर करें।
• प्लेट सीलरः 2 टुकड़े।
• पुनः बंद करने योग्य प्लास्टिक बैगः 1 सेट।
• निर्देश पुस्तिका: 1 प्रति।

सम्बंधित सुझाव

• यह किट केवल इन-विट्रो डायग्नोस्टिक उपयोग के लिए है।
• धोने की प्रक्रिया. अधूरी धोने से परीक्षण के परिणामों पर प्रतिकूल प्रभाव पड़ेगा. प्रत्येक कुएं को लगभग 0.3 मिलीलीटर धोने के बफर से 3 बार धोएं। यदि कोई स्वचालित वॉशर उपलब्ध नहीं है, तो प्रत्येक कुएं को धोने के लिए एक बार धोएं।धोने के लिए निम्नानुसार मैन्युअल रूप से किया जा सकता है: सभी धोने बफर बाहर पाने के लिए प्लेट जोरदार उल्टा और कुछ सेकंड के लिए अवशोषक कागज पर अच्छी तरह से के किनारे को ब्लॉक करें। पानी के साथ प्रत्येक अच्छी तरह से भरने और 10 सेकंड के लिए रहने के लिए। इन चरणों को 3 बार दोहराएं.प्लेट को अवशोषक ऊतक पर घुमाकर, और कठोर सतह पर कई बार मारकर प्लेट को ब्लॉट सूखाएं।
• ड्रिप प्रक्रिया. उपयोग से पहले बोतल को धीरे-धीरे मिलाएं. जबरदस्त उछाल से बहुत अधिक फोम हो सकता है. बोतल को उल्टा करें और फोम न होने के लिए एक या दो बूंदों को अवशोषक ऊतक पर निचोड़ें।बोतल को कुएं के ऊपर उठाएं और सुनिश्चित करें कि बूंद कुओं के किनारे को नहीं छूती है.
• पढ़ने की प्रक्रिया. एक तरंग दैर्ध्य पाठक का उपयोग किया जाता है अगर पाठक के शून्य बिंदु को सही करने के लिए रिक्त कुएं का उपयोग. 450nm और 630nm के साथ डबल तरंग दैर्ध्य पाठकों का उपयोग किया जाता है, तोशून्य बिंदु को सही करने की कोई आवश्यकता नहीं है.

भंडारण. पूरे किट को एक वर्ष के लिए 2~8°C पर रखा जाना चाहिए.

तैयारी

1सभी नमूनों और अभिकर्मकों को कमरे के तापमान (~ 25°C) तक पहुंचने दें और उपयोग से पहले धीरे-धीरे उल्टा करके अच्छी तरह से मिलाएं।

2धोने के लिए बफर तैयार करें धोने के लिए एकाग्रता को 20 गुना डिआयनयुक्त पानी से पतला करें। पतला धोने का घोल कम से कम एक सप्ताह के लिए कमरे के तापमान पर स्थिर रहता है।

चेतावनी

1विभिन्न लोट से अभिकर्मकों का आदान-प्रदान न करें और न ही अन्य व्यावसायिक रूप से उपलब्ध किट से अभिकर्मकों का उपयोग करें। परीक्षणों के इष्टतम प्रदर्शन के लिए किट के घटक सटीक रूप से मेल खाते हैं।

2हाइपरलिपिडेमिया और इक्टेरस वाले नमूनों में पता लगाने के परिणामों पर कोई प्रभाव नहीं दिखता है। लेकिन गंभीर हेमोलिसिस वाले नमूनों में परिणाम का रंग प्रभावित होगा, अन्य परीक्षण विधियों का उपयोग करने का सुझाव दिया जाता है।

3प्रयोग से पहले अभिकर्मकों और नमूनों को कमरे के तापमान तक पहुंचने दें। प्रयोग से पहले अभिकर्मक को धीरे-धीरे हिलाएं।

4. केंद्रित धोने का तरल पदार्थ कमरे के तापमान पर क्रिस्टल का उत्पादन करेगा, उपयोग से पहले पूरी तरह से पतला किया जाना चाहिए।

5माइक्रोप्लेट सीलिंग झिल्ली का पुनः प्रयोग कभी न करें।

6. एंटी-स्पर्म एंटीबॉडी, एंटी-एंडोमेट्रियल एंटीबॉडी युक्त नमूने परिणामों को प्रभावित नहीं करेंगे.

7किट के प्रत्येक घटक को निष्क्रिय कर दिया गया था, हालांकि, इसे संभावित संक्रामक माना जाना चाहिए।

प्रयोक्ताओं के लिए सावधानी

1- हाथ से किसी भी प्रकार के मुंह से पाइपेटिंग को रोकना चाहिए। प्रत्येक नमूने के लिए केवल एक बार में इस्तेमाल होने वाले टिप्स वाले पाइपेट्स का उपयोग करें।

2विभिन्न मास्टर लोटों से सामग्री न मिलाएं। समाप्ति तिथि के बाद किट घटकों का उपयोग न करें।

3सभी सामग्रियों को उपयोग से पहले कमरे के तापमान पर लाया जाना चाहिए।