CA199 ट्यूमर मार्कर

नियत उपयोग

कार्बोहाइड्रेट एंटीजन 19-9 के लिए डिटेक्शन किट ((CA199)))) ELISA। इसका उपयोग मानव सीरम में CA19-9 के लिए मात्रात्मक परीक्षणों में किया जाता है।

संक्षिप्त और नैदानिक महत्व

कार्बोहाइड्रेट एंटीजन 19-9 (CA19-9) एक ट्यूमर-संबद्ध एंटीजन ओलिगोसाकाराइड है और इसे अग्नाशय के कैंसर एंटीजन या सियालीटेड लुईस एंटीजन भी कहा जाता है। CA19-9 का आणविक भार 5000 से अधिक है,000 और इसके एपिटोप सीरम में म्यूसिन के साथ ग्लाइकोप्रोटीन से बने होते हैं।. CA19-9 कोलोरेक्टल कैंसर कोशिकाओं में मौजूद है, और यह अग्नाशय, फेफड़े, थायरॉयड, अंडाशय, प्रोस्टेट के कैंसर ऊतक में भी मौजूद है।

इस अभिकर्मक का उपयोग मुख्य रूप से कैंसर रोगियों की गतिशील निगरानी के लिए रोग की प्रगति या सहायक चिकित्सीय प्रभाव निर्धारित करने के लिए किया जाता है, लेकिन इसकी एकाग्रता ट्यूमर आकार, विकास के साथ सहसंबंधित नहीं है।,कुछ सौम्य रोगों में (जैसे तीव्र अग्नाशयशोथ, कोलेसिस्टिटिस, कोलांगिटिस कोलेस्टैसिस, हेपेटाइटिस आदि)) यह भी देखा जा सकता है कि सूचकांक में विभिन्न डिग्री में वृद्धि हुई है।इसलिए, CA19-9 को कैंसर स्क्रीनिंग, प्रारंभिक निदान और अन्य उद्देश्यों के लिए सामान्य आबादी के लिए एक प्रभावी सामान्य स्क्रीनिंग परीक्षण नहीं माना जाना चाहिए।

सिद्धांत

सीए-19-9 एक सैंडविच सिद्धांत का उपयोग करता है, एंजाइम से जुड़ा प्रतिरक्षा अवशोषक परीक्षण। सीरम में सीए-19-9 के स्तर को मापने के लिए,किट में सीए-19-9 के मोनोक्लोनल एंटीबॉडी से लेपित प्लास्टिक के कुएं दिए गए हैं।रोगी के नमूने और एचआरपी से चिह्नित एक अन्य मोनो-एंटीबॉडी को जोड़ने के बाद, सीए-19-9, यदि मौजूद हो, ठोस चरण एंटीबॉडी से जुड़ा होता है और एक एचआरपी-एंटीबॉडी CA-19-9 एंटीबॉडी बना देता है।.टीएमबी सब्सट्रेट जोड़ने के बाद, परिणाम ईआईएप्लेट रीडर द्वारा प्राप्त किया जाता है।

आपूर्ति किए गए अभिकर्मक

लेपित माइक्रोप्लेट: 1 प्लेट (8 × 12 कुएं), उपयोग करने के लिए तैयार। एंटी-CA19-9 एंटीबॉडी से लेपित और एल्यूमीनियम बैग में सील। खोलने के बाद नमी से बचाने के लिए सूखी सामग्री के साथ फिर से बंद करने योग्य बैग में स्ट्रिप्स निकालें।समाप्ति तिथि तक 2°C से 8°C पर रखें.

एचआरपी संयुग्मितः1 6 मिलीलीटर का फ्लास्क, उपयोग के लिए तैयार है. इसमें एचआरपी लेबल एंटी- सीए 19-9 और प्रोक्लिन -300 संरक्षक है. 2 ~ 8 डिग्री सेल्सियस पर समाप्ति तिथि तक स्टोर करें.

कैलिब्रेटर:0.5ml के 5 फ्लायल्स, उपयोग के लिए तैयार, S0 से S4 के साथ लेबल किए गए और CA19-9 की एकाग्रता 0 है।102, 40, 100, 150 U/ml 2°C से 8°C पर समाप्ति तिथि तक रखें।

नियंत्रणः1 0.5 मिलीलीटर का फ्लास्क, उपयोग के लिए तैयार है। समाप्ति तिथि तक 2 ~ 8°C पर रखें। एकाग्रता 39.4 ~ 73.2 U/ml है।

क्रोमोजेन ए:7 ml का 1 फ्लास्क, उपयोग के लिए तैयार है। H2O2 युक्त है। 2 ~ 8°C पर समाप्ति तिथि तक रखें।

7 मिलीलीटर का 1 फ्लास्क, उपयोग के लिए तैयार है। टीएमबी युक्त है। समाप्ति तिथि तक 2 ~ 8 डिग्री सेल्सियस पर रखें।

रोकें समाधानः1 7 ml का फ्लास्क, उपयोग के लिए तैयार है. H2SO4 युक्त है. 2 ~ 8°C पर समाप्ति तिथि तक रखें.

वाश बफर:15 मिलीलीटर का 1 फ्लास्क, 20 गुना केंद्रित, परीक्षण से पहले डीआयनयुक्त पानी से पतला। NaCl, फॉस्फेट और tween-20 युक्त। समाप्ति तिथि तक 2 ~ 8 °C पर स्टोर करें।

प्लेट सीलर:दो टुकड़े।

प्लास्टिक की फिर से बंद करने योग्य थैलीःएक सेट।

निर्देश पुस्तिका:एक प्रति।

तैयारी

1सभी नमूनों और अभिकर्मकों को कमरे के तापमान तक पहुंचने दें और उपयोग से पहले धीरे-धीरे उल्टा करके अच्छी तरह से मिलाएं।

2. धोने के लिए बफर तैयार करें धोने के लिए एकाग्रता 20 गुना विघटित के साथ पतला

ASSAYPROCEDURE:

1. प्रयोग करने के लिए माइक्रोटिट्रेशन स्ट्रिप्स को चिह्नित करें. सभी कैलिब्रेटर और नियंत्रण को डुप्लिकेट सेट करना चाहिए.

2- 50 यूएल कैलिब्रेटर/नियंत्रण/प्रोटेक्टर्स को कुओं में डालें।

3प्रत्येक कुएं में 50 यूएल एचआरपीसी जोड़ें। प्लेट सीलर से स्ट्रिप्स को कवर करें। एक फ्लैट बेंच पर माइक्रोटाइटर प्लेट को घुमाकर इसे धीरे-धीरे मिलाएं। प्लेट को 37 डिग्री सेल्सियस पर 1 घंटे के लिए इनक्यूबेट करें।

4प्रत्येक कुएं को 3 बार, प्रत्येक बार 10 सेकंड तक धोएं (धोने की प्रक्रिया देखें) ।

5प्रत्येक कुएं में 50 यूएल क्रोमोजेन एटो डालें।

6प्रत्येक कुएं में 50 यूएल क्रोमोजेन बी डालें।

7.पट्टियों को ताजा प्लेट सीलर से ढक दिया।

8. माइक्रोटीटर प्लेट को फ्लैट बेंच पर घुमाकर धीरे-धीरे मिलाएं. प्लेट को 37°C पर 15 मिनट तक बुखार में रखें.

9प्रत्येक कुएं में 50 यूएल स्टॉपिंग सॉल्यूशन डालें और पूरी तरह मिलाएं।

10. 10 मिनट के भीतर प्लेट का अवशोषण पढ़ें (पढ़ने की प्रक्रिया देखें)

प्रयोक्ताओं के लिए सावधानी

1- हाथ से किसी भी प्रकार के मुंह से पाइपेटिंग को रोकना चाहिए। प्रत्येक नमूने के लिए केवल एक बार में इस्तेमाल होने वाले टिप्स वाले पाइपेट्स का उपयोग करें।

2विभिन्न मास्टर लोटों से सामग्री न मिलाएं। समाप्ति तिथि के बाद किट घटकों का उपयोग न करें।

3सभी सामग्रियों को उपयोग से पहले कमरे के तापमान पर लाया जाना चाहिए।