एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए एचईवी आईजीएम एलिसा टेस्ट किट सीरम बनाम प्लाज्मा

हेपेटाइटिस ई वायरस (एलिसा) के लिए आईजीएम एंटीबॉडी के लिए डायग्नोसिटक किट
कैटलॉग नंबर: BE402A

1. सिद्धांत

यह किट दो चरणों वाली ऊष्मायन प्रक्रिया के साथ सीरम या प्लाज्मा में एचईवी (एंटी-एचईवी) के लिए आईजीएम एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए ठोस चरण, कैप्चर एलिसा विधि को नियोजित करती है।पॉलीस्टीरिन माइक्रोवेल शुद्ध सक्रिय माउस एंटी ह्यूमन आईजीएम (μ चेन) मोनोक्लोनल एंटीबॉडी के साथ पूर्व-लेपित है।HRP संयुग्मित पुनः संयोजक HEV प्रतिजन अनुरेखक के रूप में कार्य करता है।टीएमबी एचआरपी के लिए सब्सट्रेट है।सब्सट्रेट टीएमबी के साथ एंजाइम प्रतिक्रिया एक रंग परिवर्तन पैदा करती है, और 450 एनएम पर अवशोषण की तीव्रता नमूने में एंटी-एचईवी एंटीबॉडी आईजीएम की उपस्थिति या अनुपस्थिति को इंगित करती है।परीक्षण विशिष्ट, संवेदनशील, प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य और संचालित करने में आसान है।यह प्रारंभिक संक्रमण के निदान और महामारी सर्वेक्षण के लिए है।

2. प्रदान की गई सामग्री

1. एंटीजन कोटेड माइक्रो वेल प्लेट 1 ब्लॉक (96वेल)
2. नमूना मंदक 1 बोतल (12 मि.ली.)
3. एंजाइम कंजुगेंट (मानव विरोधी IgM -HRP) 1 बोतल (12 मिली)
4. नकारात्मक नियंत्रण 1 शीशी (1ml)
5. सकारात्मक नियंत्रण 1 शीशी (1ml)
6.20 X वॉश बफर (प्रयोग करने से पहले कमजोर पड़ना) 1 बोतल (30 मिली)
7. सब्सट्रेट ए 1 बोतल (6 मिली)
8. सब्सट्रेट बी 1 बोतल (6 मिली)
9. स्टॉप सॉल्यूशन (2M H2SO4) 1 बोतल (6ml)
10. प्लास्टिक बैग 1 बैग
11. सील पेपर 3 पीस
12. मैनुअल 1 प्रत्येक

3परीक्षा प्रक्रिया

1. एंटीबॉडी आईजीजी के लिए एलिसा किट को हेपेटाइटिस ई वायरस (सभी अभिकर्मकों) और नमूनों को उपयोग करने से पहले कमरे के तापमान पर लाएं (लगभग 30 मिनट)।

2. डीडीएच 2 ओ के साथ केंद्रित वॉश बफर 1:19 पतला करें।

3. प्रत्येक परीक्षण के लिए, एक रिक्त, दो सकारात्मक और तीन नकारात्मक नियंत्रण सेट करें।सकारात्मक और नकारात्मक नियंत्रण कुओं में क्रमशः 100μl सकारात्मक और नकारात्मक नियंत्रण सीरम जोड़ें।

4. एक दूसरे परीक्षण कुएं में 100μl नमूना diluents जोड़ें, फिर परीक्षण कुओं में 10 μl परीक्षण नमूना पर।नमूनों को अच्छी तरह मिलाने के लिए ऊपर और नीचे पिपेट करें।

5. कुओं को सील पेपर से ढक दें, और फिर 37 डिग्री सेल्सियस पर 30 मिनट के लिए इनक्यूबेट करें।

6. सभी कुओं में तरल त्यागें और कुओं को धोने के घोल से भरें।15 सेकंड के लिए अलग रख दें, सभी कुओं में तरल छोड़ दें और कुओं को धोने के घोल से भर दें।5 बार दोहराएं और आखिरी बार धोने के बाद कुओं को सुखा लें।

7. खाली को छोड़कर प्रत्येक कुएं में 100 μl एंजाइम संयुग्मी जोड़ें।

8. कुओं को सील पेपर से ढक दें, और फिर 37 डिग्री सेल्सियस पर 30 मिनट के लिए इनक्यूबेट करें।

9. चरण 6 दोहराएँ।

10. खाली कुएं सहित प्रत्येक कुएं में क्रमशः 50μl सब्सट्रेट ए और बी जोड़ें।हल्के से मिलाएं, प्रकाश से सुरक्षित रखें और 37 डिग्री सेल्सियस पर 15 मिनट इनक्यूबेट करें।

11. खाली कुएं सहित प्रतिक्रिया को रोकने के लिए प्रत्येक कुएं में 50μl स्टॉप सॉल्यूशन डालें।

12. रिक्त के विरुद्ध 450 एनएम पर अवशोषण को मापें, या 450 एनएम/630-690 एनएम पर अवशोषण को मापें।