थायरोट्रोपिन टीएसएच एलिसा टेस्ट थायराइड उत्तेजक हार्मोन टेस्ट

गर्म बिक्री टीएसएच एलिसा टेस्ट किट
आरईएफ: डीएस177701 96 परीक्षण

उपयोग का उद्देश्य
मानव सीरम में थायरोट्रोपिन के इन विट्रो मात्रात्मक निर्धारण के लिए इम्यूनोसे।

1. सारांश

• थायराइड-उत्तेजक हार्मोन (TSH, थायरोट्रोपिन) एक ग्लाइकोप्रोटीन है जिसका आणविक भार लगभग होता है।30000 डाल्टन और दो सबयूनिट शामिल हैं।
• सीरम सांद्रता का मापन अक्सर थायरोट्रोपिन (TSH), एक ग्लाइकोप्रोटीन जिसका आणविक भार 28,000 डाल्टन होता है और पूर्वकाल पिट्यूटरी से स्रावित होता है, को आमतौर पर प्राथमिक और माध्यमिक (पिट्यूटरी) हाइपोथायरायडिज्म के निदान के लिए उपलब्ध सबसे संवेदनशील संकेतक माना जाता है। 2))।
• टीएसएच माप प्राथमिक थायराइड रोग से माध्यमिक और तृतीयक (हाइपोथैलेमिक) हाइपोथायरायडिज्म को अलग करने में समान रूप से उपयोगी होते हैं।पिट्यूटरी से टीएसएच रिलीज को थायरोट्रोपिन रिलीजिंग फैक्टर (टीआरएच) द्वारा नियंत्रित किया जाता है, जो हाइपोथैलेमस द्वारा स्रावित होता है, और पिट्यूटरी में टी 4 और ट्राईआयोडोथायरोनिन (टी 3), थायरॉयड हार्मोन की सीधी क्रिया द्वारा नियंत्रित होता है।
• T3 और T4 के स्तर को बढ़ाने से TRH के उत्तेजक प्रभावों के लिए पिट्यूटरी की प्रतिक्रिया कम हो जाती है।माध्यमिक और तृतीयक हाइपोथायरायडिज्म में, टी 4 की सांद्रता आमतौर पर कम होती है और टीएसएच का स्तर आमतौर पर कम या सामान्य होता है।या तो पिट्यूटरी टीएसएच की कमी (द्वितीयक हाइपोथायरायडिज्म) या टीआरएच (तृतीयक हाइपोथायरायडिज्म) द्वारा पिट्यूटरी की उत्तेजना की अपर्याप्तता इसका कारण बनती है।
• टीआरएच उत्तेजना परीक्षण इन स्थितियों को अलग करता है।माध्यमिक हाइपोथायरायडिज्म में, टीआरएच के लिए टीएसएच प्रतिक्रिया धुंधली होती है, जबकि तृतीयक हाइपोथायरायडिज्म में एक सामान्य या विलंबित प्रतिक्रिया प्राप्त होती है। इसके अलावा, इम्यूनोएंजाइमोमेट्रिक assays के आगमन ने प्रयोगशाला को पर्याप्त संवेदनशीलता प्रदान की है ताकि यूथायरॉइड आबादी से हाइपरथायरायडिज्म को अलग करने और इसकी उपयोगिता का विस्तार किया जा सके। टीएसएच माप।यह विधि दूसरी पीढ़ी की परख है, जो हाइपरथायरॉइड-यूथायरॉयड रेंज में भेदभाव के साधन प्रदान करती है।(3)

2. अभिकर्मक सामग्री प्रदान की गई
• लेपित माइक्रोप्लेट, 8 x 12 स्ट्रिप्स, 96 कुएं, माउस मोनोक्लोनल एंटी-टीएसएच के साथ पूर्व-लेपित।
• अंशशोधक, 6 शीशियाँ, 1 मिली प्रत्येक, उपयोग के लिए तैयार;सांद्रता: 0(ए), 0.5(बी), 2(सी), 5(डी), 10(ई) और 25(एफ) μIU/एमएल।
• बीएसए (गोजातीय सीरम एल्ब्यूमिन) युक्त Tris-NaCl बफर में एंजाइम संयुग्म, 1 शीशी, 6.0 मिली एचआरपी (हॉर्सरैडिश पेरोक्सीडेज) लेबल वाला माउस मोनोक्लोनल एंटी-टीएसएच।इसमें 0.1% ProClin300 प्रिजर्वेटिव है।
• सब्सट्रेट, 1 शीशी, 11ml, उपयोग के लिए तैयार, (tetramethylbenzidine) TMB।
• स्टॉप सॉल्यूशन, 1 शीशी, 6.0 मिली 1 mol/l सल्फ्यूरिक एसिड।
• वॉश सॉल्यूशन कॉन्सेंट्रेट, 1 शीशी, 25 मिली (40X कॉन्संट्रेटेड), पीबीएस-ट्वीन वॉश सॉल्यूशन।
• आईएफयू, 1 प्रति।
• प्लेट का ढक्कन: 1 टुकड़ा।

आवश्यक सामग्री (लेकिन प्रदान नहीं की गई)
• 450nm और 620nm तरंग दैर्ध्य शोषक क्षमता के साथ माइक्रोप्लेट रीडर।
• माइक्रोप्लेट वॉशर।
• इनक्यूबेटर।
• प्लेट शेकर।
• माइक्रोपिपेट और मल्टीचैनल माइक्रोपिपेट 1.5% से बेहतर की सटीकता के साथ 50μl वितरित करते हैं।
• शोषक कागज।
• आसुत जल

3. परीक्षण प्रक्रिया

सुनिश्चित करें कि माप से पहले मरीजों के नमूने, अंशशोधक और नियंत्रण परिवेश के तापमान (18-25 ℃) पर हैं।उपयोग करने से पहले धीरे-धीरे इनवर्टिंग के माध्यम से सभी अभिकर्मकों को मिलाएं।

• केवल आवश्यक कुओं की संख्या का उपयोग करें और प्रत्येक अंशशोधक और नमूने की परख के लिए माइक्रोप्लेट्स के कुओं को प्रारूपित करें।• प्रत्येक कुएं में 25 डिग्री सेल्सियस अंशशोधक या नमूने जोड़ें।

• प्रत्येक कुएं में 100 µ एल एंजाइम संयुग्म जोड़ें।

• मिक्स करने के लिए माइक्रोप्लेट को 30 सेकंड के लिए धीरे से हिलाएं।

• प्लेट को प्लेट के ढक्कन से ढक दें और 60 मिनट के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट करें।

• सूक्ष्म प्लेट की सामग्री को सफाई या आकांक्षा द्वारा त्यागें।अगर सड़ रहा है, तो प्लेट को अब्सॉर्बेंट पेपर से सुखाकर टैप करें और ब्लॉट करें।

• धो समाधान के 350 µ एल जोड़ें, छानना (नल और धब्बा) या महाप्राण।कुल 5 वॉश के लिए 4 अतिरिक्त बार दोहराएं।एक स्वचालित माइक्रोप्लेट स्ट्रिप वॉशर का उपयोग किया जा सकता है।धोने के अंत में, प्लेट को उल्टा कर दें और किसी भी अवशिष्ट वॉश सॉल्यूशन को अब्सॉर्बेंट पेपर पर टैप करें।

• प्रत्येक अच्छी तरह से सब्सट्रेट के 100 µ एल जोड़ें ।

• 20 मिनट के लिए प्रतिक्रिया के लिए अंधेरे में परिवेश के तापमान (18-25 ℃) पर कवर और इनक्यूबेट करें।सबस्टेट जोड़ने के बाद प्लेट को हिलाएं नहीं।

• प्रत्येक कुएं में 50 µ l स्टॉप सॉल्यूशन जोड़ें ।

• कुओं के भीतर तरल मिलाने के लिए 15-20 सेकंड के लिए हिलाएं।यह सुनिश्चित करना महत्वपूर्ण है कि नीला रंग पूरी तरह से पीले रंग में बदल जाए।

• माइक्रो प्लेट रीडर में प्रत्येक कुएं के अवशोषण को 450 एनएम (620 से 630 एनएम का उपयोग करके संदर्भ तरंग दैर्ध्य के रूप में अच्छी तरह से खामियों को कम करने के लिए) पढ़ें।स्टॉप सॉल्यूशन जोड़ने के 30 मिनट के भीतर परिणामों को पढ़ा जाना चाहिए