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उत्पाद विवरण:
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| उद्देश्य: | केवल अनुसंधान उपयोग के लिए | समाप्ति तिथि: | 6 महीने |
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| भंडारण: | 2-8 ℃ | विनिर्देश: | 48 कुएँ और 96 कुएँ |
| तरीका: | सैंडविच | परख: | सीरम, प्लाज्मा, कल्चर मीडिया या कोई जैविक तरल पदार्थ |
| प्रमुखता देना: | CD141 THBD THRM एलिसा किट,मानव थ्रोम्बोमोडुलिन एलिसा किट,TM Fetomodulin ELISA किट |
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अनुसंधान उपयोग के लिए मानव थ्रोम्बोमोडुलिन, टीएम, फेटोमोडुलिन, सीडी 141, टीएचबीडी, टीएचआरएम एलिसा किट
मानव थ्रोम्बोमोडुलिन, टीएम, फेटोमोडुलिन, सीडी 141, टीएचबीडी, टीएचआरएम एलिसा किट
किट के साथ उपलब्ध कराई गई सामग्री
| किट के साथ उपलब्ध कराई गई सामग्री | 48 निर्धारण | 96 निश्चय | भंडारण | |
| 1 | उपयोगकर्ता पुस्तिका | 1 | 1 | आर टी |
| 2 | क्लोजर प्लेट झिल्ली | 2 | 2 | आर टी |
| 3 | सीलबंद बैग | 1 | 1 | आर टी |
| 4 | माइक्रोएलिसा स्ट्रिपप्लेट | 1 | 1 | 2-8℃ |
| 5 | मानक | 0.5 मिली × 1 बोतल | 0.5 मिली × 1 बोतल | 2-8℃ |
| 6 | मानक मंदक | 1.5 मिली × 1 बोतल | 1.5 मिली × 1 बोतल | 2-8℃ |
| 7 | एचआरपी-संयुग्म अभिकर्मक | 3 मिलीलीटर × 1 बोतल | 6 मिलीलीटर × 1 बोतल | 2-8℃ |
| 8 | नमूना मंदक | 3 मिलीलीटर × 1 बोतल | 6 मिलीलीटर × 1 बोतल | 2-8℃ |
| 9 | क्रोमोजेन समाधान ए | 3 मिलीलीटर × 1 बोतल | 6 मिलीलीटर × 1 बोतल | 2-8℃ |
| 10 | क्रोमोजेन समाधान बी | 3 मिलीलीटर × 1 बोतल | 6 मिलीलीटर × 1 बोतल | 2-8℃ |
| 1 1 | समाधान रोकें | 3 मिलीलीटर × 1 बोतल | 6 मिलीलीटर × 1 बोतल | 2-8℃ |
| 12 | धो समाधान | 20 मिली (20X) × 1 बोतल | 20 मिली (30X) × 1 बोतल | 2-8℃ |
सिद्धांत
यह एलिसा किट विधि के रूप में सैंडविच-एलिसा का उपयोग करती है।इस किट में प्रदान की गई माइक्रोएलिसा स्ट्रिपप्लेट को थ्रोम्बोमोडुलिन के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी के साथ पूर्व-लेपित किया गया है।मानकों या नमूनों को उपयुक्त माइक्रोएलिसा स्ट्रिपप्लेट कुओं में जोड़ा जाता है और विशिष्ट एंटीबॉडी के साथ जोड़ा जाता है।फिर एक हॉर्सरैडिश पेरोक्साइड (एचआरपी) - थ्रोम्बोमोडुलिन के लिए विशिष्ट संयुग्मित एंटीबॉडी को प्रत्येक माइक्रोएलिसा स्ट्रिपप्लेट में अच्छी तरह से जोड़ा जाता है और ऊष्मायन किया जाता है।मुक्त घटक धुल जाते हैं।टीएमबी सब्सट्रेट समाधान प्रत्येक कुएं में जोड़ा जाता है।केवल वे कुएं जिनमें थ्रोम्बोमोडुलिन और एचआरपी संयुग्मित थ्रोम्बोमोडुलिन एंटीबॉडी होते हैं, वे नीले रंग के दिखाई देंगे और फिर स्टॉप सॉल्यूशन को जोड़ने के बाद पीले हो जाएंगे।ऑप्टिकल घनत्व (OD) को 450 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक रूप से मापा जाता है।OD मान थ्रोम्बोमोडुलिन की सांद्रता के समानुपाती होता है।आप नमूनों के आयुध डिपो की तुलना मानक वक्र से करके नमूनों में थ्रोम्बोमोडुलिन की एकाग्रता की गणना कर सकते हैं।
नमूना तैयार करना
1.सीरम की तैयारी
पूरे रक्त को इकट्ठा करने के बाद, रक्त को कमरे के तापमान पर बिना किसी व्यवधान के थक्का बनने दें।इसमें आमतौर पर 10-20 मिनट लगते हैं।20 मिनट के लिए 2,000-3,000 rpm पर केंद्रापसारक द्वारा थक्का निकालें ।यदि आरक्षण के दौरान अवक्षेप दिखाई देते हैं, तो नमूने को फिर से सेंट्रीफ्यूग किया जाना चाहिए।
2.प्लाज्मा तैयारी
थक्कारोधी (EDTA या साइट्रेट) के साथ पूरे रक्त को ट्यूबों में एकत्रित करें।10-20 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर इनक्यूबेट करने के बाद, 2,000-3,000 आरपीएम पर 20 मिनट के लिए ट्यूबों को केंद्रापसारित किया जाता है ।सतह पर तैरनेवाला ध्यान से प्लाज्मा नमूनों के रूप में लीजिए ।यदि आरक्षण के दौरान अवक्षेप दिखाई देते हैं, तो नमूने को फिर से सेंट्रीफ्यूग किया जाना चाहिए।
3.मूत्र के नमूने
मूत्र को सड़न रोकनेवाला ट्यूबों में एकत्र करें।2,000-3,000 rpm पर 20 मिनट के लिए केंद्रापसारक के बाद ध्यान से supernatant लीजिए ।यदि आरक्षण के दौरान अवक्षेप दिखाई देते हैं, तो नमूने को फिर से सेंट्रीफ्यूग किया जाना चाहिए।मस्तिष्कमेरु द्रव और प्लुरोपेरिटोनियल द्रव की तैयारी प्रक्रिया मूत्र के नमूने की तरह ही है।
4.सेल के नमूने
यदि आप कोशिकाओं के स्राव का पता लगाना चाहते हैं, तो संस्कृति सतह पर तैरनेवाला को सड़न रोकनेवाला ट्यूबों में इकट्ठा करें।2,000-3,000 rpm पर 20 मिनट के लिए केंद्रापसारक के बाद ध्यान से supernatant लीजिए ।यदि आप इंट्रासेल्युलर घटकों का पता लगाना चाहते हैं, तो कोशिकाओं को 1X10 . तक पतला करें6पीबीएस के साथ / एमएल (पीएच 7.2-7.4)।कोशिकाओं को बार-बार ठंड और विगलन द्वारा इंट्रासेल्युलर घटकों को मुक्त करने के लिए नष्ट कर दिया गया था।2,000-3,000 rpm पर 20 मिनट के लिए केंद्रापसारक के बाद ध्यान से supernatant लीजिए ।यदि आरक्षण के दौरान अवक्षेप दिखाई देते हैं, तो नमूने को फिर से सेंट्रीफ्यूग किया जाना चाहिए।
5.ऊतक के नमूने
ऊतक के नमूनों को काटा जाता है, तौला जाता है, तरल नाइट्रोजन में जमाया जाता है और भविष्य में उपयोग के लिए -80 ℃ पर संग्रहीत किया जाता है।पीबीएस (पीएच 7.4) जोड़ने के बाद ऊतक के नमूनों को समरूप बनाया गया।नमूने 4 ℃ पर संचालित किया जाना चाहिए।2,000-3,000 rpm पर 20 मिनट के लिए केंद्रापसारक के बाद ध्यान से supernatant लीजिए ।एलिसा परख और भविष्य के उपयोग के लिए सतह पर तैरनेवाला विभाज्य।
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