अनुसंधान उपयोग के लिए सैंडविच एलिसा VD3 RUO परीक्षण किट विटामिन D3 एलिसा किट

मानव विटामिन डी3;वीडी3 एलिसा किट

• समाप्ति तिथि: छह महीने.
• भंडारण: 2-8 ℃.
• हमारा ह्यूमन विटामिन डी3 (वीडी3) एलिसा किट मानव सीरम, प्लाज्मा, कल्चर मीडिया या किसी भी जैविक द्रव में विटामिन डी3 (वीडी3) के स्तर को परखने के लिए है।

सिद्धांत

  यह एलिसा किट विधि के रूप में सैंडविच-एलिसा का उपयोग करती है।इस किट में प्रदान की गई माइक्रोएलिसा स्ट्रिपप्लेट को विटामिन डी3 (वीडी3) के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी के साथ पूर्व-लेपित किया गया है।मानकों या नमूनों को उपयुक्त माइक्रोएलिसा स्ट्रिपप्लेट कुओं में जोड़ा जाता है और विशिष्ट एंटीबॉडी के साथ जोड़ा जाता है।फिर एक हॉर्सरैडिश पेरोक्साइड (एचआरपी) - विटामिन डी 3 (वीडी 3) के लिए विशिष्ट संयुग्मित एंटीबॉडी को प्रत्येक माइक्रोएलिसा स्ट्रिपप्लेट में अच्छी तरह से जोड़ा जाता है और ऊष्मायन किया जाता है।मुक्त घटक धुल जाते हैं।टीएमबी सब्सट्रेट समाधान प्रत्येक कुएं में जोड़ा जाता है।केवल वे कुएँ जिनमें विटामिन D3 (VD3) और HRP संयुग्मित विटामिन D3 (VD3) एंटीबॉडी होते हैं, नीले रंग के दिखाई देंगे और फिर स्टॉप सॉल्यूशन डालने के बाद पीले हो जाएंगे।ऑप्टिकल घनत्व (OD) को 450 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक रूप से मापा जाता है।OD मान विटामिन D3 (VD3) की सांद्रता के समानुपाती होता है।आप नमूनों के OD की तुलना मानक वक्र से करके नमूनों में विटामिन D3 (VD3) की सांद्रता की गणना कर सकते हैं।

किट के साथ उपलब्ध कराई गई सामग्री

• मानकों का कमजोर पड़ना

माइक्रोएलिसा स्ट्रिपप्लेट में मानकों के लिए दस कुएं निर्धारित हैं।वेल 1 और वेल 2 में, 100μl स्टैंडर्ड सॉल्यूशन और 50μl स्टैंडर्ड डाइल्यूशन बफर को मिलाया जाता है और अच्छी तरह मिलाया जाता है।वेल 3 और वेल 4 में, वेल 1 और वेल 2 से 100μl घोल क्रमशः मिलाया जाता है।फिर 50μl मानक कमजोर पड़ने वाले बफर को जोड़ा जाता है और अच्छी तरह मिलाया जाता है।वेल 3 और वेल 4 से 50μl घोल को त्याग दिया जाता है। वेल 5 और वेल 6 में, वेल 3 और वेल 4 से 50μl घोल क्रमशः मिलाया जाता है।फिर 50μl मानक कमजोर पड़ने वाले बफर को जोड़ा जाता है और अच्छी तरह मिलाया जाता है।वेल 7 और वेल 8 में क्रमशः वेल 5 और वेल 6 से 50μl घोल मिलाया जाता है।फिर 50μl मानक कमजोर पड़ने वाले बफर को जोड़ा जाता है और अच्छी तरह मिलाया जाता है।वेल 9 और वेल 10 में क्रमशः वेल 7 और वेल 8 से 50μl घोल मिलाया जाता है।फिर 50μl मानक कमजोर पड़ने वाले बफर को जोड़ा जाता है और अच्छी तरह मिलाया जाता है।50μl घोल को वेल 9 और वेल 10 से निकाल दिया जाता है। कमजोर पड़ने के बाद, सभी कुओं में कुल मात्रा 50μl होती है और सांद्रता 30 एनजी / एमएल, 20 एनजी / एमएल, 10 एनजी / एमएल, 5 एनजी / एमएल और 2.5 एनजी / होती है। एमएल, क्रमशः।

परिणामों की गणना

मानव विटामिन D3 (VD3) मानक और इसके संगत रीडिंग OD की ज्ञात सांद्रता को क्रमशः लॉग स्केल (x-अक्ष) और लॉग स्केल (y-अक्ष) पर प्लॉट किया जाता है।नमूने में मानव विटामिन D3 (VD3) की सांद्रता नमूने के OD को Y-अक्ष पर प्लॉट करके निर्धारित की जाती है।मूल एकाग्रता की गणना कमजोर पड़ने वाले कारक को गुणा करके की जाती है।

शुद्धता

अंतर-परख प्रेसिजन (एक परख के भीतर परिशुद्धता): निम्न, मध्यम और उच्च स्तर के मानव विटामिन डी3 (वीडी3) वाले 3 नमूनों का क्रमशः एक प्लेट पर 20 बार परीक्षण किया गया।

अंतर-परख परिशुद्धता (परख के बीच सटीक): निम्न, मध्यम और उच्च स्तर के मानव विटामिन डी3 (वीडी3) वाले 3 नमूनों का परीक्षण 3 अलग-अलग प्लेटों पर किया गया, प्रत्येक प्लेट में 8 प्रतिकृतियां।

सीवी (%) = एसडी / माध्य X100

इंट्रा-परख: सीवी<10%

अंतर-परख: सीवी<12%

परख रेंज

0.8 एनजी/एमएल -36 एनजी/एमएल

संवेदनशीलता:

0.3 एनजी / एमएल

• प्राप्त होने पर किट को 4 डिग्री सेल्सियस पर स्टोर करें। किट को परख से पहले कमरे के तापमान में संतुलित किया जाना चाहिए।ह्यूमन विटामिन डी3 (वीडी3) एंटीबॉडी-लेपित प्लेट से किसी भी अनावश्यक स्ट्रिप्स को हटा दें, उन्हें ज़िप-लॉक फ़ॉइल में बंद कर दें और 4 डिग्री सेल्सियस पर रखें।
• प्रत्येक परख में मानक वक्र को शामिल किया जाना चाहिए।प्रतिकृति कुओं की सिफारिश की जाती है।यदि नमूने का OD मान मानकों के पहले कुएं से अधिक है, तो कृपया परीक्षण से पहले नमूने (n बार) को पतला करें।मूल विटामिन D3 (VD3) सांद्रता की गणना करते समय, कृपया कुल कमजोर पड़ने वाले कारक (XnX5) को गुणा करें।