उत्पाद विवरण:
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अनुशंसित नाम: | विटामिन डी3 | संक्षिप्त नाम: | वीडी3;वीडी-3 |
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तरीका: | सैंडविच एलिसा | Cat. बिल्ली। No. नहीं।: | इन-हू4090 |
जीन नाम: | VD3 | प्रयोग: | केवल अनुसंधान उपयोग के लिए |
प्रमुखता देना: | एलिसा VD3 RUO परीक्षण किट,सैंडविच एलिसा VD3 परीक्षण किट,अनुसंधान विटामिन D3 एलिसा किट |
मानव विटामिन डी3;वीडी3 एलिसा किट
सिद्धांत
यह एलिसा किट विधि के रूप में सैंडविच-एलिसा का उपयोग करती है।इस किट में प्रदान की गई माइक्रोएलिसा स्ट्रिपप्लेट को विटामिन डी3 (वीडी3) के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी के साथ पूर्व-लेपित किया गया है।मानकों या नमूनों को उपयुक्त माइक्रोएलिसा स्ट्रिपप्लेट कुओं में जोड़ा जाता है और विशिष्ट एंटीबॉडी के साथ जोड़ा जाता है।फिर एक हॉर्सरैडिश पेरोक्साइड (एचआरपी) - विटामिन डी 3 (वीडी 3) के लिए विशिष्ट संयुग्मित एंटीबॉडी को प्रत्येक माइक्रोएलिसा स्ट्रिपप्लेट में अच्छी तरह से जोड़ा जाता है और ऊष्मायन किया जाता है।मुक्त घटक धुल जाते हैं।टीएमबी सब्सट्रेट समाधान प्रत्येक कुएं में जोड़ा जाता है।केवल वे कुएँ जिनमें विटामिन D3 (VD3) और HRP संयुग्मित विटामिन D3 (VD3) एंटीबॉडी होते हैं, नीले रंग के दिखाई देंगे और फिर स्टॉप सॉल्यूशन डालने के बाद पीले हो जाएंगे।ऑप्टिकल घनत्व (OD) को 450 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक रूप से मापा जाता है।OD मान विटामिन D3 (VD3) की सांद्रता के समानुपाती होता है।आप नमूनों के OD की तुलना मानक वक्र से करके नमूनों में विटामिन D3 (VD3) की सांद्रता की गणना कर सकते हैं।
किट के साथ उपलब्ध कराई गई सामग्री
किट के साथ उपलब्ध कराई गई सामग्री | 48 निर्धारण | 96 निश्चय | भंडारण | |
1 | उपयोगकर्ता पुस्तिका | 1 | 1 | आर टी |
2 | क्लोजर प्लेट झिल्ली | 2 | 2 | आर टी |
3 | सीलबंद बैग | 1 | 1 | आर टी |
4 | माइक्रोएलिसा स्ट्रिपप्लेट | 1 | 1 | 2-8℃ |
5 | मानक: 45ng / मिली | 0.5 मिली × 1 बोतल | 0.5 मिली × 1 बोतल | 2-8℃ |
6 | मानक मंदक | 1.5 मिली × 1 बोतल | 1.5 मिली × 1 बोतल | 2-8℃ |
7 | एचआरपी-संयुग्म अभिकर्मक | 3 मिलीलीटर × 1 बोतल | 6 मिलीलीटर × 1 बोतल | 2-8℃ |
8 | नमूना मंदक | 3 मिलीलीटर × 1 बोतल | 6 मिलीलीटर × 1 बोतल | 2-8℃ |
9 | क्रोमोजेन समाधान ए | 3 मिलीलीटर × 1 बोतल | 6 मिलीलीटर × 1 बोतल | 2-8℃ |
10 | क्रोमोजेन समाधान बी | 3 मिलीलीटर × 1 बोतल | 6 मिलीलीटर × 1 बोतल | 2-8℃ |
1 1 | समाधान रोकें | 3 मिलीलीटर × 1 बोतल | 6 मिलीलीटर × 1 बोतल | 2-8℃ |
12 | धो समाधान | 20 मिली (20X) × 1 बोतल | 20 मिली (30X) × 1 बोतल | 2-8℃ |
माइक्रोएलिसा स्ट्रिपप्लेट में मानकों के लिए दस कुएं निर्धारित हैं।वेल 1 और वेल 2 में, 100μl स्टैंडर्ड सॉल्यूशन और 50μl स्टैंडर्ड डाइल्यूशन बफर को मिलाया जाता है और अच्छी तरह मिलाया जाता है।वेल 3 और वेल 4 में, वेल 1 और वेल 2 से 100μl घोल क्रमशः मिलाया जाता है।फिर 50μl मानक कमजोर पड़ने वाले बफर को जोड़ा जाता है और अच्छी तरह मिलाया जाता है।वेल 3 और वेल 4 से 50μl घोल को त्याग दिया जाता है। वेल 5 और वेल 6 में, वेल 3 और वेल 4 से 50μl घोल क्रमशः मिलाया जाता है।फिर 50μl मानक कमजोर पड़ने वाले बफर को जोड़ा जाता है और अच्छी तरह मिलाया जाता है।वेल 7 और वेल 8 में क्रमशः वेल 5 और वेल 6 से 50μl घोल मिलाया जाता है।फिर 50μl मानक कमजोर पड़ने वाले बफर को जोड़ा जाता है और अच्छी तरह मिलाया जाता है।वेल 9 और वेल 10 में क्रमशः वेल 7 और वेल 8 से 50μl घोल मिलाया जाता है।फिर 50μl मानक कमजोर पड़ने वाले बफर को जोड़ा जाता है और अच्छी तरह मिलाया जाता है।50μl घोल को वेल 9 और वेल 10 से निकाल दिया जाता है। कमजोर पड़ने के बाद, सभी कुओं में कुल मात्रा 50μl होती है और सांद्रता 30 एनजी / एमएल, 20 एनजी / एमएल, 10 एनजी / एमएल, 5 एनजी / एमएल और 2.5 एनजी / होती है। एमएल, क्रमशः।
परिणामों की गणना
मानव विटामिन D3 (VD3) मानक और इसके संगत रीडिंग OD की ज्ञात सांद्रता को क्रमशः लॉग स्केल (x-अक्ष) और लॉग स्केल (y-अक्ष) पर प्लॉट किया जाता है।नमूने में मानव विटामिन D3 (VD3) की सांद्रता नमूने के OD को Y-अक्ष पर प्लॉट करके निर्धारित की जाती है।मूल एकाग्रता की गणना कमजोर पड़ने वाले कारक को गुणा करके की जाती है।
शुद्धता
अंतर-परख प्रेसिजन (एक परख के भीतर परिशुद्धता): निम्न, मध्यम और उच्च स्तर के मानव विटामिन डी3 (वीडी3) वाले 3 नमूनों का क्रमशः एक प्लेट पर 20 बार परीक्षण किया गया।
अंतर-परख परिशुद्धता (परख के बीच सटीक): निम्न, मध्यम और उच्च स्तर के मानव विटामिन डी3 (वीडी3) वाले 3 नमूनों का परीक्षण 3 अलग-अलग प्लेटों पर किया गया, प्रत्येक प्लेट में 8 प्रतिकृतियां।
सीवी (%) = एसडी / माध्य X100
इंट्रा-परख: सीवी<10%
अंतर-परख: सीवी<12%
परख रेंज
0.8 एनजी/एमएल -36 एनजी/एमएल
संवेदनशीलता:
0.3 एनजी / एमएल
व्यक्ति से संपर्क करें: Mr. Steven
दूरभाष: +8618600464506