उत्पाद विवरण:
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अनुशंसित नाम: | 8-हाइड्रॉक्सी-डेसोक्सीगुआनोसिन | संक्षिप्त नाम: | 8-ओएचडीजी |
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तरीका: | सैंडविच | Cat. बिल्ली। No. नहीं।: | In-Mo1117 |
समाप्ति तिथि: | आधा वर्ष | प्रयोग: | माउस सीरम, प्लाज्मा, कल्चर मीडिया या कोई जैविक द्रव। |
प्रमुखता देना: | 8-OHdG एलिसा किट,माउस 8-Hydroxydeoxyguanosine परीक्षण किट,सैंडविच 8OHdG एलिसा किट |
माउस 8-Hydroxy-desoxyguanosine;8-OHdG ELISA Kit
सिद्धांत
यह एलिसा किट विधि के रूप में सैंडविच-एलिसा का उपयोग करती है।इस किट में प्रदान की गई माइक्रोएलिसा स्ट्रिपप्लेट को 8-ओएचडीजी के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी के साथ पूर्व-लेपित किया गया है।मानकों या नमूनों को उपयुक्त माइक्रोएलिसा स्ट्रिपप्लेट कुओं में जोड़ा जाता है और विशिष्ट एंटीबॉडी के साथ जोड़ा जाता है।फिर एक हॉर्सरैडिश पेरोक्साइड (एचआरपी) - 8-ओएचडीजी के लिए विशिष्ट संयुग्मित एंटीबॉडी को प्रत्येक माइक्रोएलिसा स्ट्रिपप्लेट में अच्छी तरह से जोड़ा जाता है और इनक्यूबेट किया जाता है।मुक्त घटक धुल जाते हैं।टीएमबी सब्सट्रेट समाधान प्रत्येक कुएं में जोड़ा जाता है।केवल वे कुएं जिनमें 8-ओएचडीजी और एचआरपी संयुग्मित 8-ओएचडीजी एंटीबॉडी होते हैं, नीले रंग में दिखाई देंगे और फिर स्टॉप सॉल्यूशन को जोड़ने के बाद पीले हो जाएंगे।ऑप्टिकल घनत्व (OD) को 450 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक रूप से मापा जाता है।OD मान 8-OHdG की सांद्रता के समानुपाती होता है।आप नमूनों के OD की मानक वक्र से तुलना करके नमूनों में 8-OHdG की सांद्रता की गणना कर सकते हैं।
किट के साथ उपलब्ध कराई गई सामग्री
किट के साथ उपलब्ध कराई गई सामग्री | 48 निर्धारण | 96 निश्चय | भंडारण | |
1 | उपयोगकर्ता पुस्तिका | 1 | 1 | आर टी |
2 | क्लोजर प्लेट झिल्ली | 2 | 2 | आर टी |
3 | सीलबंद बैग | 1 | 1 | आर टी |
4 | माइक्रोएलिसा स्ट्रिपप्लेट | 1 | 1 | 2-8℃ |
5 | मानक 1350 स्नातकोत्तर/एमएल | 0.5 मिली × 1 बोतल | 0.5 मिली × 1 बोतल | 2-8℃ |
6 | मानक मंदक | 1.5 मिली × 1 बोतल | 1.5 मिली × 1 बोतल | 2-8℃ |
7 | एचआरपी-संयुग्म अभिकर्मक | 3 मिलीलीटर × 1 बोतल | 6 मिलीलीटर × 1 बोतल | 2-8℃ |
8 | नमूना मंदक | 3 मिलीलीटर × 1 बोतल | 6 मिलीलीटर × 1 बोतल | 2-8℃ |
9 | क्रोमोजेन समाधान ए | 3 मिलीलीटर × 1 बोतल | 6 मिलीलीटर × 1 बोतल | 2-8℃ |
10 | क्रोमोजेन समाधान बी | 3 मिलीलीटर × 1 बोतल | 6 मिलीलीटर × 1 बोतल | 2-8℃ |
1 1 | समाधान रोकें | 3 मिलीलीटर × 1 बोतल | 6 मिलीलीटर × 1 बोतल | 2-8℃ |
12 | धो समाधान | 20 मिली (20X) × 1 बोतल | 20 मिली (30X) × 1 बोतल | 2-8℃ |
माइक्रोएलिसा स्ट्रिपप्लेट में मानकों के लिए दस कुएं निर्धारित हैं।वेल 1 और वेल 2 में, 100μl स्टैंडर्ड सॉल्यूशन और 50μl स्टैंडर्ड डाइल्यूशन बफर को मिलाया जाता है और अच्छी तरह मिलाया जाता है।वेल 3 और वेल 4 में, वेल 1 और वेल 2 से 100μl घोल क्रमशः मिलाया जाता है।फिर 50μl मानक कमजोर पड़ने वाले बफर को जोड़ा जाता है और अच्छी तरह मिलाया जाता है।वेल 3 और वेल 4 से 50μl घोल को त्याग दिया जाता है। वेल 5 और वेल 6 में, वेल 3 और वेल 4 से 50μl घोल क्रमशः मिलाया जाता है।फिर 50μl मानक कमजोर पड़ने वाले बफर को जोड़ा जाता है और अच्छी तरह मिलाया जाता है।वेल 7 और वेल 8 में क्रमशः वेल 5 और वेल 6 से 50μl घोल मिलाया जाता है।फिर 50μl मानक कमजोर पड़ने वाले बफर को जोड़ा जाता है और अच्छी तरह मिलाया जाता है।वेल 9 और वेल 10 में क्रमशः वेल 7 और वेल 8 से 50μl घोल मिलाया जाता है।फिर 50μl मानक कमजोर पड़ने वाले बफर को जोड़ा जाता है और अच्छी तरह मिलाया जाता है।50μl घोल को वेल 9 और वेल 10 से निकाल दिया जाता है। कमजोर पड़ने के बाद, सभी कुओं में कुल मात्रा 50μl होती है और सांद्रता 900 पीजी / एमएल, 600 पीजी / एमएल, 300 पीजी / एमएल, 150 पीजी / एमएल और 75 पीजी / एमएल होती है। , क्रमश।
परिणामों की गणना
माउस 8-ओएचडीजी मानक और इसके संगत रीडिंग ओडी की ज्ञात सांद्रता क्रमशः लॉग स्केल (एक्स-अक्ष) और लॉग स्केल (वाई-अक्ष) पर प्लॉट की जाती है।नमूने में माउस 8-ओएचडीजी की एकाग्रता को वाई-अक्ष पर नमूने के आयुध डिपो की साजिश रचकर निर्धारित किया जाता है।मूल एकाग्रता की गणना कमजोर पड़ने वाले कारक को गुणा करके की जाती है।
शुद्धता
इंट्रा-परख प्रेसिजन (एक परख के भीतर परिशुद्धता): निम्न, मध्यम और उच्च स्तर के माउस 8-ओएचडीजी वाले 3 नमूनों का क्रमशः एक प्लेट पर 20 बार परीक्षण किया गया।
अंतर-परख परिशुद्धता (परख के बीच सटीक): निम्न, मध्यम और उच्च स्तर के माउस 8-ओएचडीजी के साथ 3 नमूनों का परीक्षण 3 अलग-अलग प्लेटों पर किया गया, प्रत्येक प्लेट में 8 प्रतिकृति।
सीवी (%) = एसडी / माध्य X100
इंट्रा-परख: सीवी<10%
अंतर-परख: सीवी<12%
परख रेंज
15 पीजी/एमएल- 1000 पीजी/एमएल
संवेदनशीलता:
4.5 पीजी / एमएल
व्यक्ति से संपर्क करें: Mr. Steven
दूरभाष: +8618600464506