बायोवेंटियन एंटी थायरोग्लोबुलिन एंटीबॉडी टेस्ट एंटी टीजी एबी टेस्ट किट

एंटी-टीजी एलिसा टेस्ट किट थायरोग्लोबुलिन एबी

1. इच्छित उपयोग

मानव सीरम में थायरोग्लोबुलिन के एंटीबॉडी के इन विट्रो मात्रात्मक निर्धारण के लिए इम्यूनोसे।एंटी-टीजी निर्धारण का उपयोग ऑटोइम्यून थायरॉयड रोगों का पता लगाने में सहायता के रूप में किया जाता है।

2. सारांश

थायरोग्लोबुलिन (टीजी) थायरॉयड ग्रंथि में निर्मित होता है और थायरॉयड कूप के लुमेन में एक मुख्य घटक है।एंजाइम थायरॉइड-विशिष्ट पेरोक्सीडेज (टीपीओ) के साथ तालमेल में, टीजी का एल-टायरोसिन के आयोडिनेशन में और थायराइड हार्मोन टी 4 और टी 3 के निर्माण में एक आवश्यक कार्य है।टीजी और टीपीओ दोनों संभावित स्वप्रतिरक्षी हैं।

टीजी (टीजी-ऑटोएंटिबॉडीज) के खिलाफ एंटीबॉडी के ऊंचे सीरम सांद्रता ऑटोइम्यूनिटी-आधारित थायरॉयडिटिस वाले विषयों में पाए जाते हैं।एंटी-टीजी के साथ-साथ एंटी-टीपीओ की उच्च सांद्रता क्रोनिक लिम्फोसाइटिक-इनफिल्ट्रेटिव थायरॉयडिटिस (हाशिमोटो रोग) का संकेत है।थायरोग्लोबुलिन एंटीबॉडी की आवृत्ति ऑटोइम्यून-थायरायडाइटिस वाले विषयों में लगभग 70-80% है, जिसमें हाशिमोटो रोग भी शामिल है, और ग्रेव्स रोग वाले व्यक्तियों में लगभग 30% है। एंटी-टीजी परख हाशिमोटो के थायरॉयडिटिस के पाठ्यक्रम की निगरानी में उपयोग के लिए महत्वपूर्ण है और विभेदक निदान के लिए (नकारात्मक एंटी-टीपीओ परीक्षण परिणामों के साथ अज्ञात मूल के संदिग्ध ऑटोइम्यून थायरॉयडिटिस के मामले, लिम्फोसाइटिक घुसपैठ के बिना ग्रेव्स रोग, और टीजी परीक्षण में टीजी-ऑटोएंटीबॉडी द्वारा हस्तक्षेप को बाहर करने के लिए)।

यद्यपि अतिरिक्त थायरॉइड एंटीबॉडी (एंटी-टीपीओ, टीएसएच-रिसेप्टर-एंटीबॉडी) को एक साथ निर्धारित करके प्रक्रिया की संवेदनशीलता को बढ़ाया जा सकता है, एक नकारात्मक परिणाम निश्चित रूप से एक ऑटोइम्यून बीमारी की उपस्थिति से इंकार नहीं करता है।एंटीबॉडी टिटर का स्तर रोग की नैदानिक ​​गतिविधि से संबंधित नहीं है।यदि रोग लंबे समय तक बना रहता है या यदि

छूट होती है।यदि एंटीबॉडी छूट के बाद फिर से प्रकट होते हैं, तो एक विश्राम की संभावना है।

एंजाइम से जुड़े इम्युनोसॉरबेंट एसेज़ मानव एंटीजन और खरगोश एंटीह्यूमन आईजीजी एंटीबॉडी (एंटी-आईजीजी) का उपयोग करते हैं।

3. अभिकर्मक सामग्री प्रदान की गई

• लेपित माइक्रोप्लेट, 8 x 12 स्ट्रिप्स, 96 कुएं।मानव टीजी प्रतिजन के साथ पूर्व-लेपित।

• कैलिब्रेटर, 6 शीशियां, 1 एमएल प्रत्येक, उपयोग के लिए तैयार;सांद्रता: 0 (ए), 50 (बी), 150 (सी), 500 (डी), 1000 (ई) और 2000 (एफ) आईयू / एमएल।

• एंजाइम संयुग्म, 1 शीशी, 11.0 एमएल एचआरपी (हॉर्सरैडिश पेरोक्सीडेज) लेबल खरगोश विरोधी मानव आईजीजी एंटीबॉडी (एंटी-आईजीजी) ट्रिस-एनएसीएल बफर में बीएसए (गोजातीय सीरम एल्ब्यूमिन) युक्त।इसमें 0.1% ProClin300 प्रिजर्वेटिव है।

• सीरम मंदक: 1 शीशी, 11mL।बफर लवण और एक डाई युक्त

• वॉश सॉल्यूशन कॉन्सेंट्रेट, 1 शीशी, 25 मिली (40X कंसंट्रेट), पीबीएस-ट्वीन वॉश सॉल्यूशन।

• सब्सट्रेट, 1 शीशी, 11ml, उपयोग के लिए तैयार, (tetramethylbenzidine) TMB।

• स्टॉप सॉल्यूशन, 1 शीशी, 6.0 मिली 1 mol/l सल्फ्यूरिक एसिड।

• आईएफयू, 1 प्रति।

• प्लेट का ढक्कन: 2 टुकड़े।

4. आवश्यक सामग्री (लेकिन प्रदान नहीं की गई)

• 450nm और 620nm तरंग दैर्ध्य शोषक क्षमता के साथ माइक्रोप्लेट रीडर।
• माइक्रोप्लेट वॉशर।
• इनक्यूबेटर।
• प्लेट शेकर।
• माइक्रोपिपेट्स और मल्टीचैनल माइक्रोपिपेट्स 1.5% से बेहतर की सटीकता के साथ 50μl वितरित करते हैं।
• शोषक कागज।
• आसुत जल

5. परीक्षण प्रक्रिया

• केवल आवश्यक कुओं की संख्या का उपयोग करें और परखने के लिए प्रत्येक अंशशोधक और नमूने के लिए माइक्रोप्लेट कुओं को प्रारूपित करें।

• प्रत्येक कुएं में 100 µ l अंशशोधक जोड़ें ।

• अंशशोधक-कुओं को छोड़कर प्रत्येक कुएं में नमूना मंदक (हरा रंग) के 100 µ एल जोड़ें ।

• प्रत्येक नमूना मंदक में 10 µ एल का नमूना जोड़ें (नोट: वेल्स में अभिकर्मक हरे से नीले रंग को बदल देंगे), फिर 30 सेकंड हिलाएं।

• प्लेट को प्लेट के ढक्कन से ढक दें और 37 डिग्री सेल्सियस पर 30 मिनट के लिए इनक्यूबेट करें ।

• सूक्ष्म प्लेट की सामग्री को छानना या आकांक्षा द्वारा त्यागें ।अगर सड़ रहा है, तो प्लेट को अब्सॉर्बेंट पेपर से सुखाकर टैप करें और ब्लॉट करें।

• धो समाधान के 350 µ एल जोड़ें, छानना (नल और धब्बा) या महाप्राण ।कुल 5 वॉश के लिए 4 अतिरिक्त बार दोहराएं।धोने के अंत में, प्लेट को उल्टा कर दें और किसी भी अवशिष्ट वॉश सॉल्यूशन को अब्सॉर्बेंट पेपर पर टैप करें।

• एंजाइम संयुग्म के 100 µ एल जोड़ें,

• प्लेट को प्लेट के ढक्कन से ढक दें और 37 डिग्री सेल्सियस पर 30 मिनट के लिए इनक्यूबेट करें

• धो समाधान के 350 µ एल जोड़ें, छानना (नल और धब्बा) या महाप्राण ।कुल 5 वॉश के लिए 4 अतिरिक्त बार दोहराएं।धोने के अंत में, प्लेट को उल्टा कर दें और किसी भी अवशिष्ट वॉश सॉल्यूशन को अब्सॉर्बेंट पेपर पर टैप करें।

• प्रत्येक अच्छी तरह से सब्सट्रेट के 100 µ एल जोड़ें ।10 मिनट के लिए प्रतिक्रिया के लिए अंधेरे में परिवेश के तापमान (18-25 ℃) पर कवर और इनक्यूबेट करें।सबस्टेट जोड़ने के बाद प्लेट को हिलाएं नहीं।

• प्रत्येक कुएं में 50 µ एल स्टॉप सॉल्यूशन जोड़ें ।

• कुओं के भीतर तरल मिलाने के लिए 15-20 सेकंड के लिए हिलाएं।यह सुनिश्चित करना महत्वपूर्ण है कि नीला रंग पूरी तरह से पीले रंग में बदल जाए।

• एक माइक्रो प्लेट रीडर में 450 एनएम (संदर्भ तरंग दैर्ध्य के रूप में 620 से 630 एनएम का उपयोग करके अच्छी तरह से खामियों को कम करने के लिए) पर प्रत्येक कुएं का अवशोषण पढ़ें।स्टॉप सॉल्यूशन जोड़ने के 30 मिनट के भीतर परिणामों को पढ़ा जाना चाहिए।