उत्पाद विवरण:
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अनुशंसित नाम: | इंटरफेरॉन गामा | जीन नाम: | इफंग |
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संक्षिप्त नाम: | IFN गामा | जीव: | मस्क मस्कुलस (माउस) |
तरीका: | सैंडविच | Cat. बिल्ली। No. नहीं।: | इन-मो1233 |
हाई लाइट: | murine ifn गामा RUO परीक्षण किट,माउस इंटरफेरॉन गामा परीक्षण किट,ifng RUO परीक्षण किट |
माउस इंटरफेरॉन ;इंटरफेरॉन गामा;आईएफएन-γ;आईएफएन-गामा;आईएफएनजी;एलिसा किट
माउस सीरम, प्लाज्मा, कल्चर मीडिया या किसी भी जैविक द्रव में इंटरफेरॉन (IFN-γ) सांद्रता के इन विट्रो निर्धारण में मात्रात्मक के लिए।
सिद्धांत
यह एलिसा किट विधि के रूप में सैंडविच-एलिसा का उपयोग करती है।इस किट में प्रदान की गई माइक्रोएलिसा स्ट्रिपप्लेट को IFN-γ के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी के साथ पूर्व-लेपित किया गया है।मानकों या नमूनों को उपयुक्त माइक्रोएलिसा स्ट्रिपप्लेट कुओं में जोड़ा जाता है और विशिष्ट एंटीबॉडी के साथ जोड़ा जाता है।फिर एक हॉर्सरैडिश पेरोक्साइड (एचआरपी) - IFN-γ के लिए विशिष्ट संयुग्मित एंटीबॉडी को प्रत्येक माइक्रोएलिसा स्ट्रिपप्लेट में अच्छी तरह से जोड़ा जाता है और इनक्यूबेट किया जाता है।मुक्त घटक धुल जाते हैं।टीएमबी सब्सट्रेट समाधान प्रत्येक कुएं में जोड़ा जाता है।केवल वे कुएं जिनमें IFN-γ और HRP संयुग्मित IFN-γ एंटीबॉडी होते हैं, नीले रंग में दिखाई देंगे और फिर स्टॉप सॉल्यूशन को जोड़ने के बाद पीले हो जाएंगे।ऑप्टिकल घनत्व (OD) को 450 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक रूप से मापा जाता है।OD मान IFN-γ की सांद्रता के समानुपाती होता है।आप नमूनों के OD की तुलना मानक वक्र से करके नमूनों में IFN-γ की सांद्रता की गणना कर सकते हैं।
किट के साथ उपलब्ध कराई गई सामग्री
किट के साथ उपलब्ध कराई गई सामग्री | 48 निर्धारण | 96 निश्चय | भंडारण | |
1 | उपयोगकर्ता पुस्तिका | 1 | 1 | आर टी |
2 | क्लोजर प्लेट झिल्ली | 2 | 2 | आर टी |
3 | सीलबंद बैग | 1 | 1 | आर टी |
4 | माइक्रोएलिसा स्ट्रिपप्लेट | 1 | 1 | 2-8℃ |
5 | मानक 270 पीजी/एमएल | 0.5 मिली × 1 बोतल | 0.5 मिली × 1 बोतल | 2-8℃ |
6 | मानक मंदक | 1.5 मिली × 1 बोतल | 1.5 मिली × 1 बोतल | 2-8℃ |
7 | एचआरपी-संयुग्म अभिकर्मक | 3 मिलीलीटर × 1 बोतल | 6 मिलीलीटर × 1 बोतल | 2-8℃ |
8 | नमूना मंदक | 3 मिलीलीटर × 1 बोतल | 6 मिलीलीटर × 1 बोतल | 2-8℃ |
9 | क्रोमोजेन समाधान ए | 3 मिलीलीटर × 1 बोतल | 6 मिलीलीटर × 1 बोतल | 2-8℃ |
10 | क्रोमोजेन समाधान बी | 3 मिलीलीटर × 1 बोतल | 6 मिलीलीटर × 1 बोतल | 2-8℃ |
1 1 | समाधान रोकें | 3 मिलीलीटर × 1 बोतल | 6 मिलीलीटर × 1 बोतल | 2-8℃ |
12 | धो समाधान | 20 मिली (20X) × 1 बोतल | 20 मिली (30X) × 1 बोतल | 2-8℃ |
माइक्रोएलिसा स्ट्रिपप्लेट में मानकों के लिए दस कुएं निर्धारित हैं।वेल 1 और वेल 2 में, 100μl स्टैंडर्ड सॉल्यूशन और 50μl स्टैंडर्ड डाइल्यूशन बफर को मिलाया जाता है और अच्छी तरह मिलाया जाता है।वेल 3 और वेल 4 में, वेल 1 और वेल 2 से 100μl घोल क्रमशः मिलाया जाता है।फिर 50μl मानक कमजोर पड़ने वाले बफर को जोड़ा जाता है और अच्छी तरह मिलाया जाता है।वेल 3 और वेल 4 से 50μl घोल को त्याग दिया जाता है। वेल 5 और वेल 6 में, वेल 3 और वेल 4 से 50μl घोल क्रमशः मिलाया जाता है।फिर 50μl मानक कमजोर पड़ने वाले बफर को जोड़ा जाता है और अच्छी तरह मिलाया जाता है।वेल 7 और वेल 8 में क्रमशः वेल 5 और वेल 6 से 50μl घोल मिलाया जाता है।फिर 50μl मानक कमजोर पड़ने वाले बफर को जोड़ा जाता है और अच्छी तरह मिलाया जाता है।वेल 9 और वेल 10 में क्रमशः वेल 7 और वेल 8 से 50μl घोल मिलाया जाता है।फिर 50μl मानक कमजोर पड़ने वाले बफर को जोड़ा जाता है और अच्छी तरह मिलाया जाता है।50μl घोल को वेल 9 और वेल 10 से निकाल दिया जाता है। कमजोर पड़ने के बाद, सभी कुओं में कुल मात्रा 50μl होती है और सांद्रता 180 पीजी / एमएल, 120 पीजी / एमएल, 60 पीजी / एमएल, 30 पीजी / एमएल और 15 पीजी / एमएल होती है। क्रमश।
परिणामों की गणना
माउस IFN-γ मानक और इसके संगत रीडिंग OD की ज्ञात सांद्रता को क्रमशः लॉग स्केल (x-अक्ष) और लॉग स्केल (y-अक्ष) पर प्लॉट किया जाता है।नमूने में माउस IFN-γ की एकाग्रता Y-अक्ष पर नमूने के आयुध डिपो को प्लॉट करके निर्धारित की जाती है।मूल एकाग्रता की गणना कमजोर पड़ने वाले कारक को गुणा करके की जाती है।
शुद्धता
इंट्रा-परख प्रेसिजन (एक परख के भीतर परिशुद्धता): निम्न, मध्यम और उच्च स्तर के माउस IFN-γ के साथ 3 नमूनों का क्रमशः एक प्लेट पर 20 बार परीक्षण किया गया।
अंतर-परख परिशुद्धता (परख के बीच सटीक): निम्न, मध्यम और उच्च स्तर के माउस IFN-γ के साथ 3 नमूनों का परीक्षण 3 अलग-अलग प्लेटों पर किया गया, प्रत्येक प्लेट में 8 प्रतिकृति।
सीवी (%) = एसडी / माध्य X100
इंट्रा-परख: सीवी<10%
अंतर-परख: सीवी<12%
परख रेंज
3पीजी/एमएल-200 पीजी/एमएल
संवेदनशीलता:
0.8pg / मिली
व्यक्ति से संपर्क करें: Mr. Steven
दूरभाष: +8618600464506