आरयूओ एंटी एचसीवी एलिसा किट

मानव हेपेटाइटिस वायरस टाइप सी (एचसीवी) आरयूओ के खिलाफ एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए एंजाइम इम्यूनोएसेज

हेपेटाइटिस सी वायरस (एचसीवी), जिसे पहले गैर-ए, गैर-बी हेपेटाइटिस (एनएएनबीएच) के पेरेंट्रेली ट्रांसमिटेड रूप के रूप में वर्णित किया गया था¹, 50% मामलों में एक पुरानी बीमारी बन जाती है।²एचसीवी इंट्रावेनस ड्रग्स के दुरुपयोग और घरेलू संपर्क के माध्यम से भी फैल सकता है।³हेपेटाइटिस सी वायरस एक एकल स्ट्रैंड आरएनए वायरस है जिसमें फ्लेविवायरस परिवार के कुछ संरचनात्मक संबंध हैं।एचसीवी सीडीएनए क्लोन के न्यूक्लिक एसिड अनुक्रमों ने कथित हेपेटाइटिस सी वायरस प्रोटीन का प्रतिनिधित्व करने वाले पुनर्मिलन पेप्टाइड के निर्माण के लिए आधार प्रदान किया.^4,5सिंथेटिक या पुनर्मिलन प्रोटीन का उपयोग करके रक्त में एंटी-हेपेटाइटिस सी वायरस एंटीबॉडी स्क्रीनिंग,एचसीवी प्रतिरोधक एंटीबॉडी के साथ स्पष्ट रूप से स्वस्थ रक्त दाताओं की पहचान करने में मदद की जिन्होंने अन्यथा वायरस को प्रसारित किया हो सकता है.⁶

यह मानव सीरम में एचसीवी एंटीबॉडी की उपस्थिति का पता लगाने के लिए एचसीवी वायरस के कोर क्षेत्रों से प्राप्त पुनर्मिलन प्रोटीन का उपयोग करके एंजाइम-लिंक्ड इम्यूनोसॉर्बेंट परीक्षण है।

किट के साथ दी गई सामग्रीः

परीक्षण प्रक्रिया

प्रत्येक नमूने और नियंत्रण को दो बार में विश्लेषण करने की दृढ़ता से सलाह दी जाती है। उपयोग से पहले सभी अभिकर्मकों को कमरे के तापमान पर संतुलित होना चाहिए।

1. 100 मिलीलीटर ((या 3 बूंदें) नमूना द्रव को अलग-अलग परीक्षण कुओं में वितरित करें।
2. 100 मिलीलीटर पॉजिटिव कंट्रोल और नेगेटिव कंट्रोल को अलग-अलग कुओं में डुप्लिकेट करें।
3. प्रत्येक परीक्षण नमूने के 10 मिलीलीटर दोहरे परीक्षण कुओं में डालें; मिश्रण के लिए भंवर।
4. 37°C पर 30 मिनट तक उगाना
5. प्रत्येक कुँए को 5 बार धोकर प्रत्येक कुँए को पतले वाश बफर से भरें, फिर सभी पानी को बाहर निकालने के लिए प्लेट को जोरदार रूप से उलट दें और कुछ सेकंड के लिए अवशोषक कागज पर कुँए के किनारे को अवरुद्ध करें।
6. प्रत्येक कुँए में 100 मिलीलीटर एंजाइम कन्जुगेट डालें। 1 मिनट के लिए समतल बेंच पर माइक्रोटाइटर प्लेट को घुमाकर इसे धीरे-धीरे मिलाएं।खाली कुंड में एंजाइम कन्जुगेट न डालें।
7. 37 डिग्री सेल्सियस पर 20 मिनट तक उगाना
8. चरण 5 के रूप में प्लेट को 5 बार धोएं।
9. प्रत्येक कुएं में सब्सट्रेट सॉल्यूशन ए (एचआरपी-सब्स्ट्रैट) की एक बूंद (50 मिलीलीटर) जोड़ें, फिर प्रत्येक कुएं में सब्सट्रेट सॉल्यूशन बी (टीएमबी) की एक बूंद (50 मिलीलीटर) जोड़ें। धीरे-धीरे मिलाएं और 10 मिनट के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट करें। .
10. रंग प्रतिक्रिया को रोकने के लिए प्रत्येक कुएं में स्टॉप सॉल्यूशन की एक बूंद (50 मिलीलीटर) डालें। दोहरी फिल्टर प्लेट रीडर के साथ 450 एनएम/630 एनएम पर ओडी मान पढ़ें।एकल फ़िल्टर प्लेट रीडर के साथ 450 एनएम पर ओडी मूल्य को पढ़ना वैकल्पिक है. (सभी कुओं से सभी ओडी रीडिंग को सही करने के लिए रिक्त कुएं के ओडी मूल्य का उपयोग करना)