RUO HBcAb Elisa किट

RUO HBcAb ELISA परीक्षण का उद्देश्य मानव सीरम/प्लाज्मा में हेपेटाइटिस बी वायरस कोर एंटीजन के प्रतिरोधी की गुणात्मक पहचान के लिए है।

हेपडनाविराइड परिवार के हिस्से के रूप में, एचबीवी एक लिपटे, डबल-स्ट्रैंड डीएनए वायरस है जो रक्त के माध्यम से हेपेटाइटिस संचरण का प्राथमिक कारण है।एचबीवी संक्रमण के प्रभाव हल्के से लेकर गंभीर हेपेटाइटिस तक होते हैंहेपेटाइटिस बी संक्रमण को वर्गीकृत करने के लिए,संक्रमण के तीन चरणों के दौरान सीरोलॉजिकल मार्करों की पहचान करने की आवश्यकता है - ऊष्मायनवायरस का मुख्य घटक हेपेटाइटिस बी कोर एंटीजन (HBcAg) है।इस कोर एंटीजन में लगभग 17kD का एक एकल पॉलीपेप्टाइड होता है जो कोर कणों के विघटन पर उत्सर्जित होता है।. एंटीजन में कम से कम एक प्रतिरक्षा निर्धारक मौजूद होता है। एचबीएसएजी की शुरुआत के तुरंत बाद, एचबीसीएजी (एंटी-एचबीसी कुल एंटीबॉडी और आईजीएम) के लिए एंटीबॉडी दिखाई देते हैं और कभी नहीं जाते हैं। अलग-अलग मामलों में,एक हेपेटाइटिस बी संक्रमण प्रतिरक्षा से पता लगाने योग्य एंटी-एचबीसी के बिना हो सकता है। यह आम तौर पर प्रतिरक्षा दमित रोगियों में पाया जाता है।विभिन्न आबादी में हेपेटाइटिस बी के प्रसार पर एंटी-एचबीसी स्क्रीनिंग से डेटा मिलता हैयह इसलिए है क्योंकि एंटी-एचबीसी तीव्र, पुरानी या हल एचबीवी संक्रमण का मार्कर है। नैदानिक सेटिंग में निदान किए जाने पर एंटी-एचबीसी की पहचान महत्वपूर्ण है।अन्य हेपेटाइटिस बी परीक्षणों के साथ, एंटी-एचबीसी मार्कर सही निदान और वायरस की प्रगति की उचित निगरानी की अनुमति देता है।एंटी-एचबीसी संभवतः हेपेटाइटिस बी संक्रमण का एकमात्र संकेतक हो सकता है (एचबीएसएजी-नकारात्मक रोगियों के अन्य परीक्षणों सहित).

सामग्री और घटक

माइक्रोप्लेटःसफेद पट्टी धारक पर फिक्स्ड रिक्त माइक्रोवेल स्ट्रिप्स। प्लेट को सूखी सामग्री के साथ एल्यूमीनियम थैली में सील किया जाता है। प्रत्येक कुएं में शुद्ध एचबीसीएजी होता है। माइक्रोवेल स्ट्रिप्स को अलग से उपयोग करने के लिए तोड़ा जा सकता है।अप्रयुक्त कुओं या पट्टियों को सूखी सामग्री के साथ उपलब्ध प्लास्टिक सील करने योग्य भंडारण बैग में रखें और 2-8°C पर वापस लाएं. एक बार खोलने के बाद, 2-8°C पर एक महीने के लिए स्थिर।

नकारात्मक नियंत्रण:(1x1. 0ml प्रति फ्लास्क) संरक्षित।00.1% ProClinTM 300 पीले रंग का तरल, हरे रंग के पेंच के ढक्कन के साथ एक शीशी में भरा हुआ। प्रोटीन-स्थिर बफर HBcAb के लिए गैर-प्रतिक्रियाशील परीक्षण किया गया। आपूर्ति के रूप में उपयोग करने के लिए तैयार। एक बार खोला गया, 2-8 डिग्री सेल्सियस पर एक महीने के लिए स्थिर।

सकारात्मक नियंत्रण:(1x1. 0ml प्रति फ्लास्क) संरक्षित।0.1% ProClinTM 300 लाल रंग का तरल लाल पेंच ढक्कन के साथ एक शीशी में भरा हुआ। एचबीसीएबी प्रोटीन-स्थिर बफर में पतला। आपूर्ति के रूप में उपयोग के लिए तैयार। एक बार खोला, 2-8 डिग्री सेल्सियस पर एक महीने के लिए स्थिर।

संयुग्मः(1x6ml प्रति फ्लास्क) संरक्षित।0.1% ProClinTM 300 लाल रंग का तरल सफेद शीशी में लाल शिकंजा टोपी के साथ. एचबीसीएजी के लिए हॉर्सरेडिस पेरोक्सीडेस-संयुक्त मोनोक्लोनल एंटीबॉडीज. आपूर्ति के रूप में उपयोग के लिए तैयार. एक बार खोला गया,2-8°C पर एक महीने के लिए स्थिर.

वाश बफर:(1x20ml प्रति बोतल) उपयोग करने से पहले पतला करें! डिटर्जेंट Tween-20 रंगहीन तरल सफेद बोतल में भरा हुआ है जिसमें सफेद पेंच ढक्कन है।PH 7.4, 20 × पीबीएस कंसंट्रेट को पतला किया जाना चाहिए1 से 19 तकउपयोग करने से पहले आसुत/डिआयोनाइज्ड पानी के साथ। एक बार पतला, कमरे के तापमान पर एक सप्ताह के लिए स्थिर, या 2-8 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत होने पर दो सप्ताह के लिए।

सब्सट्रेट ए:(1x6ml प्रति फ्लास्क) हरे रंग के पेंच ढक्कन के साथ एक सफेद फ्लास्क में भरा हुआ रंगहीन तरल यूरिया पेरोक्साइड समाधान। आपूर्ति के अनुसार उपयोग के लिए तैयार। एक बार खोला गया, 2-8°C पर एक महीने के लिए स्थिर।

सब्सट्रेट बी:1x6ml प्रति फ्लास्क) काले पेंच ढक्कन के साथ काले फ्लास्क में भरा हुआ रंगहीन तरल पदार्थ. टीएमबी (टेट्रामेथिल बेंजिडाइन) समाधान. आपूर्ति के अनुसार उपयोग के लिए तैयार. एक बार खोला गया, 2-8°C पर एक महीने के लिए स्थिर।

रोक समाधान:(1x6ml प्रति शीशी) सफेद शीशी में सफेद पेंच ढक्कन के साथ रंगहीन तरल पदार्थ। पतला सल्फ्यूरिक एसिड समाधान (0.5M H)₂SO₄) आपूर्ति के अनुसार उपयोग के लिए तैयार है। एक बार खोला, 2-8°C पर एक महीने के लिए स्थिर।

प्लास्टिक सील करने योग्य बैग:उपयोग में न आने वाली पट्टियों को संलग्न करने के लिए 1 यूनिट

पैकेज INSERTएक प्रति

कार्डबोर्ड प्लेट कवर2 पत्तियाँ

इनक्यूबेशन के दौरान प्लेटों को ढंकना और कुओं के वाष्पीकरण या दूषित होने से रोकना।

कार्यवाही

अभिकर्मकों की तैयारी:अभिकर्मकों को कमरे के तापमान (18-30°C) तक पहुंचने दें। धोने के निर्देशों के अनुसार वॉश बफर (20X) को पतला करें।बफर को पतला करने के लिए आसुत या डीआयनयुक्त पानी और केवल स्वच्छ पात्रों का प्रयोग करेंअन्य सभी अभिकर्मकआपूर्ति के रूप में उपयोग के लिए तैयार.

1. तैयारी:परीक्षण के लिए नियंत्रण और रोगी के नमूने के लिए माइक्रोप्लेट्स के कुओं को प्रारूपित करें। किसी भी अप्रयुक्त माइक्रोवेल स्ट्रिप्स को एल्यूमीनियम बैग सील में वापस रखें और 2-8 डिग्री सेल्सियस पर स्टोर करें।
2. नमूना जोड़ना:नियंत्रण या नमूनों के 50μl को निर्दिष्ट कुएं में जोड़ें।
3. संयुग्मित जोड़ना:50μl जोड़ेंसंयुग्मितखाली के अलावा हर कुएं में।
4. ऊष्मायन:प्लेट को प्लेट कवर से ढक दें और 3 दिनों के लिए इनक्यूबेट करें0 मिनट37°C पर।
5. धोना:इनक्यूबेशन के अंत में, प्लेट कवर को हटा दें और फेंक दें। प्रत्येक कुएं को 5 बार पतले वाश बफर से धोएं। प्रत्येक बार माइक्रोवेल को 30-60 सेकंड तक भिगोने दें।अंतिम धुलाई चक्र के बाद, प्लेट को ब्लटिंग पेपर या साफ तौलिया पर नीचे घुमाएं और किसी भी अवशेष को हटाने के लिए इसे टैप करें।
6. सब्सट्रेट जोड़ना:प्रत्येक कुएं में 50μl सब्सट्रेट सॉल्यूशन ए और 50μl सब्सट्रेट सॉल्यूशन बी जोड़ें।10 मिनट37°C पर प्रकाश से बचते हुए।
7. रोक समाधान जोड़ना:एक बहु-चैनल पाइपेट का उपयोग कर या मैन्युअल रूप से, जोड़ें50μमैंस्टॉप सॉल्यूशन को प्रत्येक कुएं में डालें और धीरे-धीरे मिलाएं।
8. अवशोषण को मापना:रिक्त कुएं के साथ प्लेट रीडर को कैलिब्रेट करें और पर अवशोषण पढ़ें450nmयदि दोहरी फ़िल्टर उपकरण का प्रयोग किया जाता है, तो संदर्भ तरंग दैर्ध्य को630nmकट-ऑफ मूल्य की गणना करें और परिणामों का मूल्यांकन करें।नोटःअंदर अवशोषण को पढ़ें10 मिनटप्रतिक्रिया रोकने के बाद) ।