आरयूओ एचबीएसएजी एलिसा किट

एचबीएसएजी के पता लगाने के लिए एंजाइम-लिंक्ड इम्यूनोसॉर्बेंट परीक्षणसीरम या प्लाज्मा में

एचबीएसएजी ईआईए एक ठोस-चरण समवर्ती सैंडविच प्रतिरक्षा परीक्षण है, जिसमें एचबीएसएजी के लिए विशिष्ट मोनोक्लोनल एंटीबॉडी और पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी का उपयोग किया जाता है।Microtiter अच्छी तरह से HBsAg के लिए विशिष्ट मोनोक्लोनल एंटीबॉडी के साथ लेपित हैं. एंटीबॉडी लेपित माइक्रोटिटर कुओं में एक सीरम नमूना एंजाइम संयुग्मित पॉलीक्लोनल एंटीबॉडी के साथ जोड़ा जाता है। एचबीएसएजी, यदि मौजूद है, तो एक एंटीबॉडी-एचबीएसएजी-एंटीबॉडी-एंजाइम परिसर का गठन करेगा।फिर अनबाउंड सामग्री को हटाने के लिए प्लेट को धोया जाता हैअंत में, कुओं में सब्सट्रेट का एक समाधान जोड़ा जाता है और इनक्यूबेट किया जाता है। नमूना में मौजूद एचबीएसएजी की मात्रा के अनुपात में एक नीला रंग विकसित होगा। The enzyme-substrate reaction can be stopped and the result is visualized by naked eye or read by EIA plate reader for absorbance at the wavelength of 450 nm(450 nm/630 nm) and is proportional to the amount of antibodies present in the specimen..

किट के साथ दी गई सामग्रीः

परीक्षण प्रक्रियाः

प्रत्येक नमूने और नियंत्रण को दो बार में विश्लेषण करने की दृढ़ता से सलाह दी जाती है। उपयोग से पहले सभी अभिकर्मकों को कमरे के तापमान पर संतुलित होना चाहिए।

1. पॉजिटिव कंट्रोल और नेगेटिव कंट्रोल की एक बूंद (50μl) दोहराने के साथ-साथ संबंधित कुओं में वितरित करें। पृष्ठभूमि नियंत्रण के रूप में एक खाली कुएं सेट करें,और 50 यूएल सीरम या प्लाज्मा के नमूनों को संबंधित परीक्षण कुओं में.
2. प्रत्येक कुँए में एंजाइम कन्जुगेट की एक बूंद (50μl) डालें। 1 मिनट के लिए समतल बेंच पर माइक्रोटाइटर प्लेट को घुमाकर इसे धीरे-धीरे मिलाएं।खाली कुंड में एंजाइम कन्जुगेट न डालें।
3. माइक्रोटाइटर प्लेट्स को एक नम बॉक्स में रखें और 37°C पर 30 मिनट तक इनक्यूबेट करें।
4. प्रत्येक कुँए को 5 बार धोकर प्रत्येक कुँए को पतले वाश बफर से भरें, फिर सभी पानी को बाहर निकालने के लिए प्लेट को जोरदार रूप से उलट दें और कुछ सेकंड के लिए अवशोषक कागज पर कुँए के किनारे को अवरुद्ध करें।
5. प्रत्येक कुएं में सब्सट्रेट सॉल्यूशन ए (एचआरपी-सब्स्ट्रैट) की एक बूंद (50μl) जोड़ें, फिर प्रत्येक कुएं में सब्सट्रेट सॉल्यूशन बी (टीएमबी) की एक बूंद (50μl) जोड़ें। धीरे-धीरे मिश्रण करें और 15 मिनट के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट करें।
6. रंग प्रतिक्रिया को रोकने के लिए प्रत्येक कुएं में स्टॉप सॉल्यूशन की 1 बूंद (50μl) जोड़ें। दोहरी फिल्टर प्लेट रीडर के साथ 450 एनएम/630 एनएम पर ओडी मान पढ़ें।एकल फ़िल्टर प्लेट रीडर के साथ 450 एनएम पर ओडी मूल्य को पढ़ना वैकल्पिक है. (सभी कुओं से सभी ओडी रीडिंग को सही करने के लिए रिक्त कुएं के ओडी मूल्य का उपयोग करना)