मानव विटामिन डी ELISएकिट 

नियत उपयोग

हमारी मानव विटामिन डी एलिसा किट मानव सीरम, प्लाज्मा, संस्कृति मीडिया या किसी भी जैविक द्रव में विटामिन डी के स्तर का आकलन करने के लिए है।

नमूना तैयार करना

1.सीरमक्षतिपूर्ति

पूरे रक्त को एकत्र करने के बाद, कमरे के तापमान पर इसे अबाधित छोड़कर रक्त को थक्के लगने दें। यह आमतौर पर 10-20 मिनट लगते हैं। 2,000-3, सेन्ट्रिफ्यूज करके थक्के को हटा दें।20 मिनट के लिए 000 आरपीएमयदि आरक्षण के दौरान अवशेष दिखाई देते हैं, तो नमूना फिर से सेंट्रिफ्यूगेट किया जाना चाहिए।

2.प्लाज्मापीक्षतिपूर्ति

पूरे रक्त को एंटीकोएग्युलेन्ट (ईडीटीए या साइट्रेट) वाली नलिकाओं में इकट्ठा करें। 10-20 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर इनक्यूबेट करने के बाद, नलिकाओं को 2,000-3,000 आरपीएम पर 20 मिनट के लिए केन्द्रापसारित किया जाता है।प्लाज्मा नमूनों के रूप में सावधानीपूर्वक सुपरनाटनट एकत्र करेंयदि आरक्षण के दौरान अवशेष दिखाई देते हैं, तो नमूना फिर से सेंट्रिफ्यूगेट किया जाना चाहिए।

3.मूत्र के नमूने

मूत्र को निर्जंतुकीकृत नलिकाओं में एकत्र करें। 2000-3000 आरपीएम पर 20 मिनट के लिए केन्द्रापसारण करने के बाद सावधानीपूर्वक सुपरनाटनट एकत्र करें। यदि आरक्षण के दौरान अवशेष दिखाई देते हैं, तो यह आवश्यक नहीं है कि आप अपने मूत्र को एक ही समय में एक ही समय में एकत्र करें।नमूना को फिर से केन्द्रापसारित किया जाना चाहिएसीरेब्रोस्पाइनल द्रव और प्ल्यूरोपेरिटोनियल द्रव की तैयारी प्रक्रिया मूत्र के नमूने के समान है।

4.कोशिकाओं के नमूने

यदि आप कोशिकाओं के स्राव का पता लगाना चाहते हैं, तो संस्कृति सुपरनाटनेंट को एसेप्टिक ट्यूबों में इकट्ठा करें। 2000-3000 आरपीएम पर 20 मिनट के लिए सेंट्रीफ्यूज करने के बाद सुपरनाटनेंट को सावधानीपूर्वक इकट्ठा करें।यदि आप इंट्रासेल्युलर घटकों का पता लगाने के लिए चाहते हैं, कोशिकाओं को पीबीएस (पीएच 7.2-7.4) के साथ 1X100/एमएल तक पतला किया गया। कोशिकाओं को बार-बार फ्रीज और डिफ्यूज करके इंट्रासेल्युलर घटकों को जारी करने के लिए नष्ट कर दिया गया।2 पर 20 मिनट के लिए सेंट्रिफ्यूज करने के बाद सावधानी से सुपरनाटनट को इकट्ठा करेंयदि आरक्षण के दौरान अवशोषण दिखाई देता है, तो नमूना फिर से सेंट्रिफ्यूगेट किया जाना चाहिए।

5.ऊतक के नमूने

ऊतक के नमूनों को काटा, तौला, तरल नाइट्रोजन में जमे और भविष्य के उपयोग के लिए -80°C पर संग्रहीत किया जाता है। पीबीएस (pH 7.4) जोड़ने के बाद ऊतक के नमूनों को समरूपित किया गया। नमूनों को 4°C पर संचालित किया जाना चाहिए।2 पर 20 मिनट के लिए सेंट्रिफ्यूज करने के बाद सावधानी से सुपरनाटनट को इकट्ठा करेंएलआईएसए परीक्षण और भविष्य के उपयोग के लिए सुपरनाटेंट को अलिकोट करें।

के के साथ उपलब्ध कराई गई सामग्रीयह

नोट्स:

• प्राप्त होने पर किट को 4°C पर रखें। किट को परीक्षण से पहले कमरे के तापमान पर संतुलित किया जाना चाहिए। मानव विटामिन डी एंटीबॉडी लेपित प्लेट से किसी भी अनावश्यक स्ट्रिप्स को हटा दें,उन्हें ज़िप-लॉक पन्नी में फिर से सील करें और 4°C पर रखें.
• ध्यान केंद्रित धुलाई बफर में वर्षा दिखाई दे सकती है. कृपया सभी वर्षा को भंग करने के लिए बफर को गर्म करें, जो परिणामों को प्रभावित नहीं करेगा।
• प्रयोग त्रुटि से बचने के लिए सटीक पाइपेट का प्रयोग किया जाना चाहिए। नमूनों को 5 मिनट से कम समय में माइक्रोप्लेट में जोड़ा जाना चाहिए। यदि बड़ी संख्या में नमूनों को शामिल किया जाता है,बहु-चैनल पाइपेट की सिफारिश की जाती है.
• मानक वक्र को प्रत्येक परीक्षण में शामिल किया जाना चाहिए। प्रतिकृति कुओं की सिफारिश की जाती है। यदि नमूना का ओडी मूल्य मानक के पहले कुएं से अधिक है, तो नमूना का ओडी मूल्य मानक के पहले कुएं से अधिक होगा।कृपया परीक्षण से पहले नमूना पतला करें (n बार)विटामिन डी की मूल एकाग्रता की गणना करते समय, कृपया कुल पतलाकरण कारक (XnX5) को गुणा करें।
• क्रॉस-कंटॉमिनेशन से बचने के लिए, माइक्रोप्लेट सीलर्स केवल एक बार के उपयोग के लिए हैं।
• कृपया सब्सट्रेट को प्रकाश से दूर रखें।
• सभी संचालन निर्माता के निर्देशों के अनुसार सख्ती से किया जाना चाहिए। Microtiter प्लेट रीडर द्वारा निर्धारित परिणाम।
• सभी नमूनों, वाशिंग बफर और कचरे को संक्रामक एजेंटों के रूप में माना जाना चाहिए।
• अलग-अलग बैचों के अभिकर्मकों को मिश्रित नहीं किया जाना चाहिए।