विटामिन ई एलिसा टेस्ट किट

दवाओं के नाम

सामान्य नामःविटामिन ई एलिसा टेस्ट किट

उद्देश्य

यह किट नमूना में वीई सांद्रता के निर्धारण के लिए एक कम है।

परीक्षण का सिद्धांत

किट में नमूना में वीई स्तर का आकलन करने के लिए एलिसा प्रतियोगिता का उपयोग किया गया है, सूक्ष्म टायटर प्लेट को कोट करने के लिए शुद्ध वीई एंटीबॉडी का उपयोग किया गया है, हम ठोस चरण एंटीबॉडी बनाते हैं,लेपित माइक्रोटाइटर्स के लिए वीई और एंटीबॉडी जो एचआरपी के साथ लेबल किए गए वीई जोड़ें, उन्हें प्रतिस्पर्धी बनाने के लिए संयोजन, धोने के बाद पूरी तरह से, टीएमबी सब्सट्रेट समाधान जोड़ें. रंग की गहराई और नमूना के वीई सकारात्मक correlated थे,ऑप्टिकल घनत्व (OD) को 450 एनएम पर माइक्रोटाइटर प्लेट रीडर से मापें, मानक वक्र द्वारा वीई एकाग्रता की गणना करें।

नमूने की आवश्यकताएं

10 बंद करने वाली प्लेट झिल्ली 2 1

1. नमूना प्रक्रिया:

(1) पानी के नमूनों को निकालने के बाद तीन बार फ्रीज-डाई चक्र दोहराया जाता है। फिर ग्लास फाइबर, संदर्भ के साथ फ़िल्टर किया जाता है।

(2) n-butanol: methanol: पानी के साथ ऊतक नमूने (5:25:70 V: V: V) निकासी, या संबंधित साहित्य के अनुसार निकासी। निकासी के बाद जितनी जल्दी हो सके प्रयोग करें। यदि यह तुरंत परीक्षण नहीं किया जा सकता है, तो नमूना 20 °C, संदर्भ में रखा जा सकता है।.

2. NaN3 युक्त नमूने का पता नहीं लगाया जा सकता है, क्योंकि NaN3 HRP गतिविधि को बाधित करता है।

धोने से परिणाम प्रभावित नहीं होता।

परीक्षण प्रक्रिया

• नमूना जोड़ेंः खाली नल को अलग से सेट करें (खाली तुलना नल में नमूना और एलिसा अभिकर्मक नहीं जोड़ते हैं, अन्यथा प्रत्येक चरण का संचालन समान है) । परीक्षण नल को अच्छी तरह से।परीक्षण के नमूने में 40μl नमूना पतला करने के लिए जो ELISA प्लेटों पर लेपित है, फिर परीक्षण नमूना 10μl (नमूना अंतिम पतला डिग्री 5 बार है) जोड़ें, अच्छी तरह से लेपित ELISA प्लेटों के तल पर नमूना जोड़ें, जहां तक संभव हो दीवार को छूने के लिए नहीं, और धीरे-धीरे मिश्रण।
• एंजाइम जोड़ें: खाली तेल को छोड़कर प्रत्येक तेल में 50μl ELISA अभिकर्मक जोड़ें। इनक्यूबेट करेंः बंद करने की प्लेट को बंद करने के बाद, 37°C पर 30 मिनट तक इनक्यूबेट करें।
• द्रव को विन्यस्त करें: 30 बार वाश कंसंट्रेट को 30 बार डिस्टिल्ड पानी और रिजर्व से पतला करें।
• धोनाः बंद करने की प्लेट के झिल्ली को खोलना, निकालना तरल, स्विंग से सूखना, हर वेल में वाशिंग बफर डालना, 30 सेकंड के लिए खड़े रहना, फिर निकालना, 5 बार दोहराएं, पैट से सूखना।
• रंगःरंग अभिकर्मक ए 50μl और रंग अभिकर्मक बी 50μl प्रत्येक हम l में जोड़ें। धीरे-धीरे मिश्रण करें, 37°C पर 10 मिनट के लिए इनक्यूबेट करें।
• प्रतिक्रिया को रोकेंःहर वेल में स्टॉप सॉल्यूशन 50μl डालें, प्रतिक्रिया को रोकें ((नीला रंग पीला रंग में तुरंत बदल जाता है) ।
• परीक्षणः शून्य के रूप में रिक्त स्थान लें, 450 एनएम पर ऑप्टिकल घनत्व (ओडी) को मापें और 15 मिनट के भीतर स्टॉप सॉल्यूशन जोड़ें।

भंडारण और स्थिरता

• 2- 8°C पर रखें।

• सील करें और अप्रयुक्त अभिकर्मकों को 2-8°C पर लौटा दें, इन स्थितियों में स्थिरता 2 महीने तक या लेबल पर दी गई समाप्ति तिथि तक बनी रहेगी, जो भी पहले हो।