साइटोमेगालोवायरस (सीएमवी) (ग्रीक में साइटो- "कोशिका" और मेगालो- "बड़ा") एक
हर्पेसवायरल्स के आदेश में वायरस की एक जीनस, परिवार में Herpesviridae, में
मानव और वानर प्राकृतिक मेजबान के रूप में कार्य करते हैं।
वर्तमान में इस जीनस में आठ प्रजातियां हैं जिनमें प्रकार प्रजातियां शामिल हैं,
मानव साइटोमेगालोवायरस (एचसीएमवी, मानव हर्पेसवायरस 5, एचएचवी- 5), जो कि
एचएचवी-5 से जुड़े रोगों में शामिल हैं
मोनोन्यूक्लियोसिस और निमोनिया।
मानव सीएमवी के लिए निहित रूप से संदर्भित करते हैं। मानव सीएमवी
सभी साइटोमेगालोवायरस में सबसे अधिक अध्ययन किया गया
• इस परीक्षण के लिए मानव सीरम या प्लाज्मा की सिफारिश की जाती है।
• 18 से 25 डिग्री सेल्सियस पर 8 घंटे से अधिक न रखें।
2-8°C पर एक दिन और -20°C पर एक महीने।
• गर्मी से निष्क्रिय नमूनों का प्रयोग न करें।
• नमूनों में जमाव और निलंबित ठोस पदार्थ परीक्षण के परिणाम में हस्तक्षेप कर सकते हैं
जो सेंट्रिफ्यूगेशन द्वारा हटाया जाना चाहिए।
सीरम के नमूनों में सेंट्रिफ्यूगेशन से पहले गठन हुआ है।
• भारी रक्तभंग, लिपेमिक या धुंधले नमूनों से बचें।
यह सुनिश्चित करें कि मरीजों के नमूने, कैलिब्रेटर और नियंत्रण उपकरण परिवेश में हों।
माप से पहले सभी अभिकर्मकों को धीरे-धीरे मिलाएं
उपयोग से पहले उलटा।
• तैयारी: दो कुओं को नकारात्मक नियंत्रण (जैसे बी1, सी1) के रूप में चिह्नित करें, दो कुओं को नकारात्मक नियंत्रण के रूप में चिह्नित करें।
सकारात्मक नियंत्रण (जैसे डी 1, ई 1) और एक रिक्त (जैसे ए 1, न तो नमूने और न ही
HRP-Conjugate को खाली कुएं में जोड़ा जाना चाहिए) यदि परिणाम
दोहरी तरंग दैर्ध्य प्लेट रीडर का उपयोग करके निर्धारित किया गया,
खाली अच्छी तरह से छोड़ दिया जा सकता है. परीक्षण के लिए आवश्यक स्ट्रिप की संख्या का उपयोग करें।
• नमूना पतला करनेवाला पदार्थ जोड़ना: 100 μL नमूना पतला करनेवाला पदार्थ अपने संबंधित में जोड़ें
कुँए हैं, सिवाय ब्लांक के।
• नमूना जोड़नाः सकारात्मक नियंत्रण, नकारात्मक नियंत्रण और 10 μL जोड़ें
रिक्त को छोड़कर अपने संबंधित कुओं में नमूने मिश्रण
प्रत्येक नमूने के लिए एक अलग निपटान पाइपेट टिप का उपयोग करें
क्रॉस-कंटॉमिनेशन।
नोटः नमूना जोड़ने के बाद, कुओं में अभिकर्मकों का रंग हरा से नीला हो जाता है।
• इनक्यूबेटिंग: प्लेट को कवर से ढक लें और 30 मिनट तक इनक्यूबेट करें
37°C पर।
• धोना: इनक्यूबेशन के अंत में, प्लेट कवर को हटा दें और फेंक दें।
प्रत्येक कुएं को 5 बार विरक्त वाश बफर से धोएं।
30-60 सेकंड के लिए भिगोने के लिए माइक्रोवेल. अंतिम धोने के चक्र के बाद, बंद
प्लेट को ब्लटिंग पेपर या साफ तौलिया पर रखें और किसी भी
अवशेष।
• कंजुगेट जोड़ना: कंजुगेट के 100 μL को प्रत्येक कुएं में जोड़ें
रिक्त।
• इनक्यूबेटिंग: प्लेट को कवर से ढक लें और 30 मिनट तक इनक्यूबेट करें
37°C पर