25-ओएच विटामिन डी एलिसा टेस्ट किट

नियत उपयोग

25-OH विटामिन डी के लिए डिटेक्शन किट (एंजाइम-लिंक्ड इम्यूनोसॉर्बेंट एसे, ELISA) । इसका उपयोग मानव सीरम में विटामिन डी के मात्रात्मक परीक्षणों में किया जाता है।

सारांश और नैदानिक महत्व

 विटामिन डी एक वसा में घुलनशील हार्मोन पूर्ववर्ती है जो मुख्य रूप से त्वचा के सूर्य के प्रकाश के संपर्क में आने से उत्पन्न होता है। विटामिन डी जैविक रूप से निष्क्रिय है और सक्रिय होने के लिए एक हाइड्रॉक्सिलेशन चरण से गुजरना पड़ता है।हमारे शरीर केवल विटामिन डी3 का संश्लेषण कर सकते हैंविटामिन डी2 को समृद्ध खाद्य पदार्थों या पूरक आहार के माध्यम से लिया जा सकता है।विटामिन डी3 और डी2 प्लाज्मा में विटामिन डी बाध्यकारी प्रोटीन (वीडीबीपी) से बंधते हैं और 25-हाइड्रोक्सीविटामिन डी (25-ओएच विटामिन डी) बनने के लिए यकृत में ले जाया जाता हैचूंकि 25-ओएच विटामिन डी मुख्य भंडारण रूप है, इसलिए इसके रक्त एकाग्रता का उपयोग विटामिन डी की समग्र स्थिति का आकलन करने के लिए किया जा सकता है। सीरम में मापा जा सकता है 25-ओएच विटामिन डी का 95% से अधिक 25-ओएच विटामिन डी3 है।,जबकि 25-OH विटामिन डी 2 केवल विटामिन डी 2 की खुराक लेने वाले रोगियों में मापने योग्य स्तर तक पहुंचता है। विटामिन डी हड्डियों के स्वास्थ्य के लिए आवश्यक है। बच्चों में, गंभीर कमी के कारण रकीट हो सकता है।बुजुर्गों मेंमांसपेशियों की कमजोरी के कारण विटामिन डी की कमी के कारण गिरने का खतरा पाया गया है। इसके अतिरिक्त, कम 25-ओएच विटामिन डी सांद्रता कम हड्डी घनत्व से जुड़ी होती है।विटामिन डी की कमी का संबंध मधुमेह से भी हैवर्तमान में बाजार में मौजूद दो विटामिन डी आहार पूरक (विटामिन डी2 और विटामिन डी3) को जिगर में 25-ओएच विटामिन डी में परिवर्तित किया जाता है।सीरम या प्लाज्मा में 25-OH विटामिन डी2 और 25-OH विटामिन डी3 की सांद्रता का योग "कुल 25-OH विटामिन डी" कहा जाता हैनैदानिक सेटिंग्स में, कुल 25-OH विटामिन डी स्तरों की सटीक निगरानी महत्वपूर्ण है। Vitamin D-deficient patients who take daily vitamin D supplements should have their serum or plasma vitamin D levels monitored regularly to achieve optimal levels and prevent their 25-OH vitamin D concentrations from reaching levels that are considered toxicकुल विटामिन डी परीक्षण 25-हाइड्रोक्सीविटामिन डी3 और डी2 को पकड़ने के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी का उपयोग करता है।यह परीक्षण मानव सीरम और प्लाज्मा में कुल 25-ओएच विटामिन डी को मात्रात्मक रूप से मापने के लिए बनाया गया है ताकि विटामिन के मूल्यांकन में सहायता मिल सके।D पर्याप्तता।

सिद्धांत

25-ओएच विटामिन डी मात्रात्मक परीक्षण किट ठोस चरण एंजाइम-लिंक्ड इम्यूनोसॉर्बेंट परीक्षण पर आधारित है।परीक्षण प्रणाली ठोस चरण (microtiter कुओं) स्थिरीकरण के लिए एक एंटीबॉडी और समाधान में एक और मोनोक्लोनल एंटीबॉडी का उपयोग करती हैतीसरा एंटीबॉडी जो किसी एंजाइम (हर्सरेडिस पेरोक्सिडेस) के साथ संयुग्मित दूसरे एंटीबॉडी को पहचानता है।मानक और परीक्षण नमूना (सीरम) 25-OH विटामिन डी एंटीबॉडी लेपित microtiter कुओं में जोड़ा जाता है, दूसरे एंटीबॉडी के साथ 30 मिनट के लिए इनक्यूबेशन। धोने के बाद, तृतीय एंटीबॉडी जोड़ी जाती है, जिसे हॉर्सरेडिस पेरोक्सीडेस (कंज्यूगेट) के साथ लेबल किया जाता है। यदि मानव 25-ओएच विटामिन डी नमूने में मौजूद है,यह कुएं पर एंटीबॉडी और एंजाइम संयुग्मित के साथ मिलकर ठोस चरण और एंजाइम-लिंक्ड एंटीबॉडी के बीच सैंडविच का गठन करेगा।चिह्नित अनबाउंड एंटीबॉडी को हटाने के लिए कुओं को पानी से धोया जाता है. टीएमबी का एक समाधान जोड़ा जाता है और 20 मिनट तक इनक्यूबेट किया जाता है, जिसके परिणामस्वरूप एक नीला रंग विकसित होता है। स्टॉप सॉल्यूशन के साथ रंग विकास को रोक दिया जाता है।रंग पीले रंग में बदल जाता है और 450 एनएम पर स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिकली मापा जाता हैविटामिन डी की सांद्रता परीक्षण नमूना की रंग तीव्रता के सीधे आनुपातिक है।

तैयारी

1सभी नमूनों और अभिकर्मकों को कमरे के तापमान (~ 25°C) तक पहुंचने दें और उपयोग से पहले धीरे-धीरे उल्टा करके अच्छी तरह से मिलाएं।

2धोने के लिए बफर तैयार करें धोने के लिए एकाग्रता को 20 गुना डिआयनयुक्त पानी से पतला करें। पतला धोने का घोल कम से कम एक सप्ताह के लिए कमरे के तापमान पर स्थिर रहता है।

प्रयोक्ताओं के लिए सावधानी

1- हाथ से किसी भी प्रकार के मुंह से पाइपेटिंग को रोकना चाहिए। प्रत्येक नमूने के लिए केवल एक बार में इस्तेमाल होने वाले टिप्स वाले पाइपेट्स का उपयोग करें।

2विभिन्न मास्टर लोटों से सामग्री न मिलाएं। समाप्ति तिथि के बाद किट घटकों का उपयोग न करें।

3सभी सामग्रियों को उपयोग से पहले कमरे के तापमान पर लाया जाना चाहिए।