केवल इन विट्रो डायग्नोस्टिक और पेशेवर उपयोग के लिए।
नाम
एंटी-सीटी IgG ELISA टेस्ट किट (सीरम/प्लाज्मा)
नियत उपयोग
यह किट मानव सीरम/प्लाज्मा में Chlamydia trachomatis (Ct) IgG का गुणात्मक पता लगाने के लिए है।
सीरम/प्लाज्मा में सीटी संक्रमण की नैदानिक जांच और निदान के लिए उपयुक्त है।
परीक्षण सिद्धांत
सीटी एंटीजन ठोस अवस्था में पॉलीस्टिरीन प्रतिक्रिया माइक्रोप्लेट में अवशोषित हो जाता है।
परीक्षण नमूने में, यह माइक्रोप्लेट में लेपित सीटी एंटीजन से बंधता है, एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स बनाता है और फिर
एंटीबॉडी लेबल वाले एंजाइम से बंधता है और सतह पर एंटीजन-एंटीबॉडी-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स बनाता है
माइक्रोप्लेट के, और सब्सट्रेट की कार्रवाई के माध्यम से इसी तरह नीले रंग में प्रदर्शित करते हैं।
मानव सीरम/प्लाज्मा में विशेष रूप से सीटी आईजीजी का पता लगा सकता है।
परीक्षण प्रक्रिया
1उपयोग से पहले सभी अभिकर्मकों को कमरे के तापमान पर 15 मिनट तक संतुलित करें।
2उपयोग से पहले वाश बफर को 1:40 की दर से आसुत पानी से पतला करें।
3. 100μL नमूना द्रव को संबंधित कुएं में जोड़ें (खाली कुएं में न जोड़ें, नकारात्मक
नियंत्रण कुओं और सकारात्मक नियंत्रण कुओं) नमूना सूक्ष्म के बराबर होना चाहिए
प्लेट, प्रत्येक प्लेट नकारात्मक नियंत्रण के साथ प्रदान किया जाना चाहिए 2 कुओं, सकारात्मक नियंत्रण 1 अच्छी तरह से और रिक्त
नियंत्रण 1 कुएं में 5μL नमूना जोड़ें, पाइपेट का उपयोग करके अच्छी तरह से मिलाएं, जोड़ें
50μL नकारात्मक नियंत्रण और सकारात्मक नियंत्रण नकारात्मक नियंत्रण कुओं और सकारात्मक नियंत्रण कुओं के लिए (नहीं
खाली कुएं में जोड़ें) ।
नोटः प्रत्येक नमूना, नकारात्मक और सकारात्मक नियंत्रण के लिए एक अलग निपटान पाइपेट टिप का उपयोग करें
क्रॉस संदूषण से बचें।
4. 30 सेकंड के लिए मिश्रण करने के लिए धीरे-धीरे हिलाएं। सीलिंग प्लेट झिल्ली के साथ 37°C पर 20 मिनट तक इनक्यूबेट करें
प्लेट को सील कर रहा है।
5. इनक्यूबेशन के अंत में, प्लेट कवर को हटा दें और फेंक दें.
20 सेकंड के लिए प्रत्येक अच्छी तरह से। 5 बार दोहराएं। अंतिम धोने के चक्र के बाद, प्लेट को चालू करें
वाशिंग पेपर या साफ तौलिया, और किसी भी अवशेष को हटाने के लिए इसे टैप करें।
6क्रमशः एंजाइम कन्जुगेट 50μL जोड़ना (खाली कुएं में न जोड़ें)
7. 37°C पर 20 मिनट तक इनक्यूबेट करें और सीलिंग प्लेट के झिल्ली से प्लेट को सील करें।
चरण 5 में 5 बार धोने के लिए कदम।
8. सब्सट्रेट ए 50μL और सब्सट्रेट बी 50μL जोड़ें (खाली कुएं में न जोड़ें) 37 °C पर इनक्यूबेट करें
10 मिनट के लिए सीलिंग प्लेट झिल्ली प्लेट सील।
9. प्रत्येक कुँए में 50μL स्टॉप सॉल्यूशन डालें (खाली कुँए में न डालें) । हिलाकर धीरे-धीरे मिलाएं,
प्रतिक्रिया बंद करने के बाद 10 मिनट के भीतर अवशोषण।
अच्छी तरह से और 450nm पर अवशोषण को पढ़ें। यदि एक दोहरी फिल्टर उपकरण का उपयोग किया जाता है, संदर्भ सेट
630nm पर तरंग दैर्ध्य सेट कोई रिक्त अच्छी तरह से अनुमति नहीं है यदि दोहरी तरंग दैर्ध्य का उपयोग करने के लिए पता लगाने के लिए।
कट-ऑफ मूल्य और परिणामों का मूल्यांकन करें।
परिणामों की व्याख्या
क्रोनोमेट्रीः माइक्रो प्लेट रीडर से 450 एनएम पर नमूना का ऑप्टिकल घनत्व (ओडी) पढ़ें।
औसत नकारात्मक नियंत्रण ओडी मान ≤ 0.1 और औसत सकारात्मक नियंत्रण ओडी मान ≥ 0.8, परीक्षण मान्य है,
अन्यथा परीक्षण अमान्य है।
कट-ऑफ मूल्य (सी.ओ.) = नकारात्मक नियंत्रण का औसत ओडी मूल्य x 3 (0.10 से गणना की जाती है जब औसत
नकारात्मक नियंत्रण का ओडी मान < 0 है।10, वास्तविक मूल्य के आधार पर गणना की जाती है जब औसत नकारात्मक नियंत्रण ओडी
मान > 0.10)
सकारात्मक परिणाम: नमूना ओडी मूल्य ≥ सी.ओ.