केवल इन विट्रो डायग्नोस्टिक और पेशेवर उपयोग के लिए।

एंटी-सीटी आईजीजी एलिसा टेस्ट किट (सीरम/प्लाज्मा)

यह किट मानव सीरम/प्लाज्मा में क्लैमाइडिया ट्रैकोमैटिस (Ct) आईजीजी का गुणात्मक पता लगाने के लिए है। यह किट सीरम/प्लाज्मा में सीटी संक्रमण के नैदानिक ​​स्क्रीनिंग और निदान के लिए उपयुक्त है।

सीटी एंटीजन को पॉलीस्टाइनिन रिएक्शन माइक्रोप्लेट में ठोस चरण में अवशोषित किया जाता है। यदि परीक्षण नमूने में सीटी आईजीजी एंटीबॉडी है, तो यह माइक्रोप्लेट में लेपित सीटी एंटीजन से जुड़ता है, एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स बनाता है, और फिर एंजाइम-लेबल वाले एंटी-एंटीबॉडी से जुड़ता है और माइक्रोप्लेट की सतह पर एंटीजन-एंटीबॉडी-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स बनाता है, और सब्सट्रेट की क्रिया के माध्यम से संबंधित कुएं में नीला रंग प्रदर्शित करता है। इसलिए, यह मानव सीरम/प्लाज्मा में सीटी आईजीजी का विशेष रूप से पता लगा सकता है।

1. उपयोग से पहले सभी अभिकर्मकों को 15 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर संतुलित करें।

2. उपयोग से पहले डिस्टिल्ड वाटर के साथ 1:40 के अनुपात में वॉश बफर को पतला करें।

3. संबंधित कुएं में 100μL नमूना डिल्यूएंट डालें (ब्लैंक कुएं, नकारात्मक नियंत्रण कुएं और सकारात्मक नियंत्रण कुएं में न डालें)। नमूना माइक्रोप्लेट की संख्या के अनुरूप होना चाहिए, प्रत्येक प्लेट में नकारात्मक नियंत्रण 2 कुएं, सकारात्मक नियंत्रण 1 कुआं और ब्लैंक नियंत्रण 1 कुआं प्रदान किया जाना चाहिए। संबंधित कुएं में 5μL नमूना डालें, पिपेट का उपयोग करके अच्छी तरह मिलाएं, नकारात्मक नियंत्रण कुओं और सकारात्मक नियंत्रण कुएं में 50μL नकारात्मक नियंत्रण और सकारात्मक नियंत्रण डालें (ब्लैंक कुएं में न डालें)।

नोट: क्रॉस संदूषण से बचने के लिए प्रत्येक नमूने, नकारात्मक और सकारात्मक नियंत्रण के लिए एक अलग डिस्पोजल पिपेट टिप का उपयोग करें।

4. 30 सेकंड के लिए धीरे-धीरे हिलाएं। प्लेट को सील करने वाली प्लेट झिल्ली के साथ 37°C पर 20 मिनट के लिए इनक्यूबेट करें।

5. इनक्यूबेशन के अंत में, प्लेट कवर को हटा दें और फेंक दें। बाहर निकालें, प्रत्येक कुएं में 20 सेकंड के लिए वॉश बफर डालें। 5 बार दोहराएं। अंतिम धुलाई चक्र के बाद, प्लेट को ब्लॉटिंग पेपर या साफ तौलिये पर उल्टा करें, और किसी भी अवशेष को हटाने के लिए इसे थपथपाएं।

6. क्रमशः एंजाइम कंजुगेट 50μL डालें (ब्लैंक कुएं में न डालें)

7. प्लेट को सील करने वाली प्लेट झिल्ली के साथ 37°C पर 20 मिनट के लिए इनक्यूबेट करें। चरण 5 में बताए अनुसार 5 बार धुलाई चरण दोहराएं।

8. सब्सट्रेट ए 50μL और सब्सट्रेट बी 50μL डालें (ब्लैंक कुएं में न डालें)। प्लेट को सील करने वाली प्लेट झिल्ली के साथ 37°C पर 10 मिनट के लिए इनक्यूबेट करें।

9. प्रत्येक कुएं में 50μL स्टॉप सॉल्यूशन डालें (ब्लैंक कुएं में न डालें)। हिलाकर धीरे से मिलाएं, प्रतिक्रिया को रोकने के 10 मिनट के भीतर अवशोषण पढ़ें। ब्लैंक कुएं के साथ प्लेट रीडर को कैलिब्रेट करें और 450nm पर अवशोषण पढ़ें। यदि डुअल फिल्टर उपकरण का उपयोग किया जाता है, तो संदर्भ तरंग दैर्ध्य 630nm पर सेट करें। यदि डुअल वेवलेंथ का उपयोग करके पता लगाया जाता है तो कोई ब्लैंक कुआं अनुमत नहीं है। कट-ऑफ मान की गणना करें और परिणामों का मूल्यांकन करें।

कालानुक्रम: माइक्रो प्लेट रीडर के साथ 450nm पर नमूने के ऑप्टिकल घनत्व (OD) को पढ़ें।

औसत नकारात्मक नियंत्रण OD मान ≤ 0.1 और औसत सकारात्मक नियंत्रण OD मान ≥ 0.8, परीक्षण मान्य है, अन्यथा परीक्षण अमान्य है।

कट-ऑफ मान (C.O.) = नकारात्मक नियंत्रण का औसत OD मान x 3 (0.10 की गणना तब की जाती है जब औसत नकारात्मक नियंत्रण OD मान 0.10 हो तो वास्तविक मान द्वारा गणना की जाती है)

सकारात्मक परिणाम: नमूना OD मान ≥ C.O.