1. माइक्रोनवेल की वांछित संख्या की गणना करें। शेष माइक्रोनवेल को हटा दें और उन्हें डेसिकेंट के साथ रखें
पुनः सील करने योग्य प्लास्टिक बैग, सील करें और बाद में उपयोग के लिए 2-8 डिग्री सेल्सियस पर स्टोर करें।
2. कैलिब्रेटर और नमूने जोड़ें:
2. 1 खाली कुआं: अभिकर्मक न डालें।
2. 2 कैलिब्रेटर कुएं: निर्दिष्ट नियंत्रण कुओं में 100 माइक्रोलीटर कैलिब्रेटर जोड़ें।
2.3 परीक्षण कुएं: परीक्षण कुओं में 100 यूएल नमूना तनुकारक जोड़ें, फिर संबंधित कुएं में 10 यूएल नमूना जोड़ें।
2.4 प्लेट को 20 सेकंड के लिए धीरे से हिलाएं, और फिर प्लेट को सीलर से ढक दें।
3. इनक्यूबेट करें: प्लेट को 37 डिग्री सेल्सियस पर 30 मिनट के लिए इनक्यूबेट करें।
4. धोने का चरण (मैन्युअल रूप से या स्वचालित धोने के साथ किया जा सकता है):
मैन्युअल धुलाई: घोल को अपशिष्ट कंटेनर में डालकर इनक्यूबेशन मिश्रण को सावधानीपूर्वक हटा दें। प्रत्येक को भरें
कुएं में 350 माइक्रोलीटर पतला वॉश बफर और 20-30 सेकंड के लिए धीरे से हिलाएं। वॉश समाधान को पूरी तरह से त्याग दें। 4 दोहराएं
अधिक बार। अंतिम धुलाई चरण पूरा करने के बाद, अवशिष्ट तरल को हटाने के लिए प्लेट को शोषक कागज पर थपथपाएं।
स्वचालित धुलाई: कुशल धुलाई सुनिश्चित करने के लिए स्वचालित प्लेट वॉशर को कैलिब्रेट किया जाना चाहिए। प्रत्येक कुएं को 350 माइक्रोलीटर से भरें
पतला वॉश बफर और 20-30 सेकंड के लिए भिगो दें। सभी कुओं को पूरी तरह से एस्पिरेट करें। 4 और बार दोहराएं।
5. संयुग्म: खाली कुएं को छोड़कर प्रत्येक कुएं में 100 माइक्रोलीटर संयुग्म जोड़ें।
6. इनक्यूबेट करें: कुओं को ढक दें और 37 डिग्री सेल्सियस पर 30 मिनट के लिए इनक्यूबेट करें।
7. धोने का चरण: चरण 4 में वर्णित अनुसार प्लेट को 5 बार धोएं।
8. सब्सट्रेट: प्रत्येक कुएं में, खाली कुएं सहित, 50 माइक्रोलीटर सब्सट्रेट ए और 50 माइक्रोलीटर सब्सट्रेट बी जोड़ें। धीरे से हिलाएं
माइक्रोनवेल 20 सेकंड के लिए। 37 डिग्री सेल्सियस पर अंधेरे में 15 मिनट के लिए इनक्यूबेट करें।
9. स्टॉप सॉल्यूशन: प्रत्येक कुएं में 50 माइक्रोलीटर स्टॉप सॉल्यूशन जोड़ें। सकारात्मक नमूनों वाले कुओं में एक पीला रंग विकसित होना चाहिए।
10. परिणाम पढ़ें: 30 मिनट के भीतर 450/630-700 एनएम पर पढ़ें।
1. नोट: माइक्रोप्लेट को 450 एनएम पर भी पढ़ा जा सकता है, लेकिन बेहतर परिणामों के लिए इसे 450/630-700 एनएम पर पढ़ने की पुरजोर सलाह दी जाती है।
परिणामों की व्याख्या
आपका संदेश 20-3,000 अक्षरों के बीच होना चाहिए!
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